Ключевая разница - гель-электрофорез и SDS Страница
Гель-электрофорез – это метод разделения макромолекул в электрическом поле. В молекулярной биологии распространен метод разделения ДНК, РНК и белков из смесей в соответствии с их молекулярными размерами. SDS Page - это тип гель-электрофореза, который используется для выделения белков из белковой смеси в зависимости от их размера. Гель-электрофорез - это термин, используемый для обозначения обычного метода, применяемого для разделения ДНК, РНК и белков, в то время как SDS Page представляет собой один из типов гель-электрофореза. В этом ключевое различие между гель-электрофорезом и SDS Page.
Что такое гель-электрофорез?
Гель-электрофорез - это распространенный метод, используемый в лабораториях для отделения заряженных молекул, таких как ДНК, РНК, белки и т. д., от их смесей. Гель используют для гель-электрофореза. Он действует как молекулярное сито. В гель-электрофорезе используются два типа гелей, а именно агарозный и полиакриламидный. Выбор геля и препарата геля являются важными факторами, которые следует учитывать при гель-электрофорезе, поскольку размер пор геля следует тщательно регулировать для хорошего разделения молекул посредством гель-электрофореза. Гель-электрофорез имеет электрическое поле, соединенное с двумя концами геля. Один конец геля имеет положительный заряд, а другой - отрицательный.
ДНК и РНК являются отрицательно заряженными молекулами. Как только они загружаются в гель с отрицательного конца геля и подвергаются воздействию электрического поля, они мигрируют через поры геля к положительно заряженному концу геля. Скорость миграции зависит от заряда и размера молекулы. Молекулы меньшего размера легче мигрируют через поры геля, чем молекулы большего размера. Следовательно, более мелкие молекулы проходят большое расстояние через гель, а более крупные молекулы проходят короткое расстояние. Для наблюдения за перемещением молекул по гелю используются специальные типы красителей. Электрическое поле прикладывается в течение определенного периода времени и останавливается, чтобы предотвратить потерю молекул и удержать молекулы в их перемещенных положениях. В геле можно наблюдать различные полосы. Эти полосы представляют собой молекулы разных размеров. Следовательно, гель-электрофорез полезен для дифференциации молекул по их размерам.
Гель-электрофорез используется в различных методах подготовки в молекулярной биологии, таких как ПЦР, RFLP, клонирование, секвенирование ДНК, саузерн-блоттинг, картирование генома и т. д.
Рисунок 01: Электрофорез в агарозном геле
Что такое страница SDS?
Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS Page) представляет собой тип гель-электрофореза, используемый для разделения белков. Когда для разделения белков используется гель-электрофорез, необходима специальная обработка, поскольку белки не заряжены отрицательно, как ДНК и РНК, и не мигрируют к положительному или отрицательному концу. Следовательно, белки денатурируют и покрывают отрицательным зарядом перед гель-электрофорезом. Это делается с использованием моющего средства, называемого додецилсульфатом натрия (SDS). Гель-электрофорез, в котором в качестве поддерживающей среды используется SDS и полиакриламидный гель, известен как SDS Page. Этот метод широко используется в биохимии, генетике, криминалистике и молекулярной биологии.
Во время страницы SDS белки смешиваются с SDS. SDS разворачивает белки в линейную форму и покрывает их отрицательным зарядом, пропорциональным их молекулярной массе. Из-за отрицательного заряда молекулы белка мигрируют к концу геля с положительным зарядом и разделяются в соответствии со своей молекулярной массой. В SDS Page в качестве твердой подложки для геля используется полиакриламид. Фактическое разделение белков в основном зависит от свойств геля. Следовательно, следует тщательно готовить полиакриламидный гель и использовать правильные концентрации полиакриламида. Гели полиакриламида показывают более высокое разрешение, чем гели агарозы. Следовательно, SDS Page считается методом разделения белков с высоким разрешением.
SDS Page представляет собой разновидность денатурирующего гель-электрофореза. Он имеет серьезное ограничение в анализе белка. Поскольку SDS денатурирует белки перед разделением, он не позволяет определять ферментативную активность, взаимодействия белков, кофакторы белков и т. д.
Рисунок 02: Страница паспорта безопасности
В чем разница между гель-электрофорезом и SDS Page?
Гель-электрофорез и ДСН Страница |
|
| Гель-электрофорез – это метод разделения макромолекул с помощью электрического поля. | SDS Page - это метод гель-электрофореза с высоким разрешением, используемый для разделения белков по их массе. |
| Gel Run | |
| Можно выполнять горизонтально или вертикально. | Страница SDS всегда располагается вертикально. |
| Основание для разделения | |
| Разделение происходит по заряду и размеру. | Разделение белков происходит по массе и заряду. |
| Разрешение | |
| Электрофорез в агарозном геле имеет низкое разрешение, а электрофорез в полиакриламидном геле – более высокое разрешение | Страница SDS имеет лучшее разрешение. |
| Денатурация | |
| Гель-электрофорез включает как денатурирующие, так и неденатурирующие методы. | SDS Page денатурирует белки перед разделением. |
Резюме – Гель-электрофорез и ДСН Страница
Гель-электрофорез - это распространенный метод, используемый для разделения и анализа ДНК, РНК и белков в зависимости от их размера и заряда. Существует два основных типа гель-электрофореза, а именно электрофорез в агарозном геле и электрофорез в полиакриламидном геле. Агарозные гели используются в основном для разделения нуклеиновых кислот; когда требуется более высокое разрешение, используются полиакриламидные гели. SDS Page - это тип гель-электрофореза, обычно используемый для разделения сложных смесей белков. Он считается методом разделения белков с высоким разрешением. В этом разница между гель-электрофорезом и SDS Page.
