Ключевая разница - иммуноцитохимия и иммуногистохимия
Иммуноцитохимия (ICC) и Иммуногистохимия (IHC) - два широко используемых метода молекулярной диагностики, которые выявляют и подтверждают возникновение как неинфекционных, так и инфекционных заболеваний на основе молекулярных маркеров, присутствующих в клетках. Ключевым отличием иммуноцитохимии от иммуногистохимии является молекула, которая используется в качестве процедуры анализа в этих методах. В ICC используются первичные и вторичные антитела, конъюгированные с такими маркерами, как флуоресценция, тогда как для диагностических определений используются IHC, моноклональные и поликлональные антитела.
Что такое иммуноцитохимия (ИЦХ)?
ICC использует первичные и вторичные антитела, связанные с маркерами, такими как флуоресцентные маркеры или ферменты, и является мощным методом обнаружения антигенов, присутствующих на клетках-мишенях, которые могут быть либо инфекционными клеточными частицами, либо раковыми опухолевыми клетками. Для иммуноцитохимии требуются три типа контроля.
- Primary Antibody – контроль, показывающий специфичность связывания первичного антитела с антигеном
- Вторичное антитело – контроль, показывающий, что метка специфична для первичного антитела
- Label Controls - показать, что маркировка является результатом добавления метки, а не результатом эндогенной маркировки.
Рисунок 01: Иммуноцитохимия маркирует отдельные белки внутри клеток (здесь тирозингидроксилаза в аксонах симпатических вегетативных нейронов показана зеленым цветом).
Первичный контроль антител специфичен для каждого нового антитела и не может повторяться для каждого эксперимента. Вторичный контроль антител разработан на основе первичного антитела, используемого в эксперименте, и включен в каждый эксперимент. Контроль маркировки включается при изменении условия процедуры, изменении образца или обнаружении неожиданной маркировки.
Двумя основными приложениями ICC являются радиоиммуноанализ (RIA) и иммуноферментный анализ (ELISA). Наиболее часто используемым антителом является иммуноглобулин G.
Что такое иммуногистохимия (ИГХ)?
В иммуногистохимии исходный образец содержит моноклональные и поликлональные антитела для определения наличия антигенов в чужеродных клетках. Этот метод основан на специфической реакции связывания антиген-антитело. Антитела, используемые при обнаружении, могут быть помечены различными маркерами; они могут быть флуоресцентными маркерами, маркерами с радиоактивной меткой или химическими маркерами. Посредством облегчения связывания in vitro между антигеном и целевым антителом можно определить наличие или отсутствие определенного белка в клетке.
Рисунок 02: Иммуногистохимическое окрашивание нормальной почки с CD10
В настоящее время ученые занимаются разработкой антител-мишеней для специфических антигенов, присутствующих в клетках, которые могут развиваться как злокачественные опухолевые клетки или антигены, присутствующие в инфекционных агентах, таких как ВИЧ.
Каковы сходства между иммуноцитохимией и иммуногистохимией?
- Реакции высокоспецифичны и точны в ICC и IHC.
- Применения ICC и IHC включают диагностику рака и инфекционных заболеваний.
- Стерильные условия должны поддерживаться в обоих условиях, и они должны выполняться in vitro
- Оба метода обеспечивают воспроизводимые результаты.
- Оба быстрые.
- Радиомаркировка, методы флуоресценции используются в качестве методов обнаружения как в ICC, так и в IHC.
- Оба основаны на паре антиген-антитело.
В чем разница между иммуноцитохимией и иммуногистохимией?
Иммуноцитохимия (ICC) и иммуногистохимия (IHC) |
|
| ICC использует маркеры, связанные с первичными и вторичными антителами, такие как флуоресцентные маркеры или ферменты, и является мощным методом обнаружения антигенов, присутствующих в клетках-мишенях. | ИГХ – это метод, использующий моноклональные и поликлональные антитела для определения наличия антигенов, представляющих собой специальные белковые маркеры, размещенные на поверхности клеток. |
| Источник образца | |
| Образцы, полученные из тканей, которые были гистологически преобразованы в тонкие срезы, используются в ICC. | IHC использует образцы, состоящие из клеток, выращенных в монослое, или клеток в суспензии, которые наносят на предметное стекло. |
| Обработка образцов | |
| В ICC клетки должны быть проницаемыми для облегчения проникновения антител к внутриклеточным мишеням. | В ИГХ клетки фиксируют формалином, заливают парафином перед окрашиванием. |
Резюме – Иммуноцитохимия и иммуногистохимия
Молекулярная диагностика используется для выявления и подтверждения возникновения как неинфекционных, так и инфекционных заболеваний на основе молекулярных маркеров, присутствующих в клетках. Молекулярные маркеры могут быть белками или последовательностями ДНК или РНК; развитие таких технологий, как ICC и IHC, проложило путь ученым для выявления болезни и ее причины на ранней стадии. Как ICC, так и IHC зависят от специфических реакций между антителом и антигеном, независимо от источника образца. Основное различие между иммуноцитохимией и иммуногистохимией заключается в обработке образцов двумя процедурами.
Загрузить PDF-версию иммуноцитохимии и иммуногистохимии
Вы можете загрузить PDF-версию этой статьи и использовать ее в автономном режиме в соответствии с примечанием к цитированию. Пожалуйста, загрузите PDF-версию здесь. Разница между иммуноцитохимией и иммуногистохимией.
