Основное различие между ионообменной и эксклюзионной хроматографией заключается в том, что ионообменная хроматография используется для анализа ионных веществ в зависимости от заряда, тогда как эксклюзионная хроматография используется для анализа больших молекул в зависимости от размера.
Хроматография – это аналитический метод, который можно использовать для анализа различных смесей. Хроматографические методы названы в соответствии с параметром, используемым для анализа веществ, например. эксклюзионная хроматография, ионообменная хроматография и т. д.
Что такое ионообменная хроматография?
Ионообменная хроматография - это аналитический метод, с помощью которого мы можем анализировать ионные вещества. Часто бывает полезно анализировать неорганические анионы и катионы (например, хлоридные и нитратные анионы, а также катионы калия и натрия). Хотя это не очень распространенный метод, с его помощью мы можем анализировать органические ионы. Более того, мы можем использовать этот метод для очистки белков, потому что белки представляют собой заряженные молекулы при определенных значениях рН. Здесь мы используем твердую неподвижную фазу, к которой могут присоединяться заряженные частицы. Например, мы можем использовать сополимеры полистирола и дивинилбензола в качестве твердой подложки.
Рисунок 01: Теория ионообменной хроматографии
Чтобы объяснить это далее, стационарная фаза имеет фиксированные ионы, такие как сульфат-анионы или катионы четвертичных аминов. Каждый из них должен связываться с противоионом (ионом с противоположным зарядом), если мы хотим сохранить нейтральность этой системы. Если противоион представляет собой катион, то мы называем систему катионообменной смолой. Но если противоион представляет собой анион, система представляет собой анионообменную смолу. Более того, в ионообменной хроматографии есть пять основных этапов:
- Начальный этап
- Адсорбция мишени
- Начало элюирования
- Конец элюции
- Регенерация
Что такое эксклюзионная хроматография?
Эксклюзионная хроматография или SEC - это аналитический метод, в котором молекулы в смеси можно разделить по их размеру и молекулярной массе. Обычно он работает с большими молекулами, называемыми макромолекулами. Обычно для анализа используют водный раствор. Тогда это называется гель-фильтрационной хроматографией. Если используется органический растворитель, это называется гель-проникающей хроматографией.
Гель-фильтрационная хроматография представляет собой форму эксклюзионной хроматографии, в которой мы используем водный раствор в качестве подвижной фазы. Поэтому подвижная фаза, которую мы часто используем в этом методе, представляет собой водный буфер. Кроме того, для этого разделения мы используем хроматографическую колонку, и нам необходимо заполнить колонку пористыми шариками. Обычно в качестве пористого материала используют сефадекс и агарозу. Следовательно, эти материалы являются стационарной фазой нашего эксперимента. Более того, мы можем использовать размер пор этих шариков для определения размера макромолекул, которые мы разделяем. Однако это всего лишь оценка.
Рисунок 02: Аппарат для эксклюзионной хроматографии
Гель-проникающая хроматография представляет собой форму эксклюзионной хроматографии, в которой мы используем органический растворитель в качестве подвижной фазы. Поэтому для этой цели мы можем использовать такие растворы, как гексан и толуол. Неподвижная фаза представляет собой пористый материал, такой же, как и в гель-фильтрационной хроматографии. Этот метод часто применяется к полимерам и другим органическим растворимым материалам. Принцип действия методики аналогичен гель-фильтрационной хроматографии.
В чем разница между ионообменной и эксклюзионной хроматографией?
Хроматография – это аналитический метод, который можно использовать для анализа различных смесей. Основное различие между ионообменной и эксклюзионной хроматографией заключается в том, что ионообменная хроматография используется для анализа ионных веществ в зависимости от заряда, тогда как эксклюзионная хроматография используется для анализа больших молекул в зависимости от размера.
Ниже на инфографике представлена дополнительная информация о разнице между ионообменной и эксклюзионной хроматографией.
Резюме – Сравнение ионообменной и эксклюзионной хроматографии
Хроматография – это аналитический метод, который можно использовать для анализа различных смесей. Основное различие между ионообменной и эксклюзионной хроматографией заключается в том, что ионообменная хроматография используется для анализа ионных веществ в зависимости от заряда, тогда как эксклюзионная хроматография используется для анализа больших молекул в зависимости от размера.
