Ключевое различие между анализами белков по Брэдфорду и Лоури заключается в том, что анализ белков по Брэдфорду основан на сдвиге поглощения красителя кумасси бриллиантового синего G-250, в то время как анализ белков по Лоури основан на реакции ионов меди (Cu+) получают окислением пептидных связей реактивом Фолина-Чокальтеу.
Анализ - это аналитический метод, который помогает охарактеризовать основные функциональные компоненты образца. Следовательно, анализ может быть как качественным, так и количественным тестом. Многие области, включая лабораторную медицину, фармакологию, экологическую биологию, молекулярную биологию, биохимию и иммунологию, регулярно используют этот тип анализов. Анализ белка по Брэдфорду и Лоури - это два биохимических анализа, которые определяют концентрацию белка в растворе образца. Оба анализа используют колориметрические методы для получения результатов.
Что такое анализ белка Брэдфорда?
Анализ белков по Бредфорду - это экспресс-спектроскопическая аналитическая процедура для анализа белков. Он показывает высокую точность при измерении концентрации белка в растворе. Мэрион Брэдфорд представила эту процедуру в 1976 году. В этом анализе общая реакция основана на аминокислотном составе измеряемых белков. Другими словами, анализ белка Брэдфорда представляет собой колориметрический анализ. В нем используется краситель кумасси бриллиантовый синий. Следовательно, этот колориметрический анализ белка зависит от сдвига поглощения красителя. Кумасси бриллиантовый синий G-250 существует в трех форматах: катионный (красный), анионный (синий) и нейтральный (зеленый). В кислых условиях красная форма красителя превращается в синюю. Это подтверждает связывание белка. Если белок отсутствует, раствор может остаться коричневого цвета.
Рисунок 01: Анализ белков по Брэдфорду
Бредфордский анализ белка отличается от других белковых анализов тем, что он менее чувствителен к интерференции различных химических соединений, присутствующих в белковом растворе. Эти соединения включают натрий, калий, глюкозу, сахарозу и т. д.
Что такое анализ белка Лоури?
Анализ белка по Лоури - это биохимический анализ, используемый для определения общего уровня белка в растворе. Оливер Х. Лоури - человек, который разработал этот реагент в 1940 году. Процедура отображает общую концентрацию белка в растворе по изменению цвета, пропорциональному концентрации белка в растворе. Следовательно, это также колориметрический анализ белка.
В основе этой процедуры лежит реакция между ионами меди (Cu+), образующимися при окислении пептидных связей, и реактивом Фолина–Чокальтеу. Также этот реактив содержит фосфорно-молибденовую кислоту и фосфорно-вольфрамовую кислоту. Однако механизм реакции анализа белка Лоури изучен недостаточно. Но он включает окисление остатков цистеина, триптофана и тирозина восстановлением реактива Фолина-Чокальтеу.
Рисунок 02. Анализ белка Лоури
Остатки цистеина вносят вклад в поглощение, наблюдаемое в анализе белка Лоури, и в результате реакции образуется блестящая синяя молекула; гетерополимолибденовый синий. Восстановление этой молекулы измеряется по поглощению при 660 нм. Следовательно, концентрация остатков цистеина и триптофана, которые восстановили реагент Фолина-Чиокальтеу, определяет общую концентрацию белка в растворе.
Каковы сходства между анализами белков Брэдфорда и Лоури?
- Анализ белка по Брэдфорду и Лоури определяет концентрацию белка в растворе.
- Оба метода являются колориметрическими.
- Кроме того, чувствительность обоих методов высока.
В чем разница между анализом белков Брэдфорда и Лоури?
Анализ белка по Брэдфорду и Лоури - это два типа анализов, которые определяют концентрацию белка в растворе. Анализ белка Брэдфорда основан на сдвиге поглощения красителя Кумасси бриллиантового синего G-250, в то время как анализ белка Лоури зависит от реакции ионов меди, образующихся при окислении пептидных связей, с реактивом Фолина-Чокальтеу. Итак, в этом ключевое различие между анализом белков Брэдфорда и Лоури. Анализ белка по Брэдфорду занимает 15 минут, чтобы получить результат, а анализ белка по Лоури - 40-60 минут, чтобы получить результат. Таким образом, это еще одно различие между анализом белков по Брэдфорду и Лоури. Кроме того, анализ белка Брэдфорда зависит от аминокислотного состава, в то время как анализ белка Лоури частично зависит от аминокислотного состава. Следовательно, это также различие между анализами белков по Брэдфорду и Лоури.
Ниже в инфографике представлена более подробная информация о различиях между анализами белков по Брэдфорду и Лоури.
Резюме – Анализ белка Брэдфорда и Лоури
Анализ – это аналитический метод, используемый для характеристики основного функционального компонента образца. Белковый анализ Брэдфорда и Лоури - это два типа белковых анализов, которые функционируют с помощью колориметрических методов. Оба анализа белка по Брэдфорду и Лоури определяют концентрацию белка в растворе. Однако ключевое различие между анализами белков Брэдфорда и Лоури заключается в используемом ими колориметрическом методе. В анализе белка Брэдфорда используется кумасси бриллиантовый синий G-250, в то время как в анализе белка Лоури используются ионы меди (Cu +) и реагент Фолина-Чокальтеу. Кроме того, метод Брэдфорда дает более быстрые результаты, чем анализ белка Лоури. Однако оба метода являются высокочувствительными и подвержены влиянию различных веществ.
