Основное различие между анализом BCA и анализом по Брэдфорду заключается в том, что анализ BCA требует больше времени и менее точен, тогда как анализ по Брэдфорду быстрый и точный.
BCA и анализ Брэдфорда представляют собой два метода анализа для определения концентрации белка. Эти два анализа имеют разные принципы анализа и различия в их точности.
Что такое анализ BCA?
Анализ BCA или анализ на бицинхониновую кислоту представляет собой биохимический анализ, полезный для определения общей концентрации белка в растворе. Этот метод также называют анализом Смита в честь его изобретателя Пола К. Смита. Этот аналитический метод показывает сходство с анализом белка Лоури, анализом белка Бредфорда или биуретовым реагентом. Мы можем наблюдать за общей концентрацией белка в данном образце по изменению цвета раствора образца, который меняется с зеленого на фиолетовый. Это изменение цвета происходит пропорционально содержанию белка. После этого мы можем использовать колориметрический метод для анализа интенсивности цвета и содержания белка в образце.
Метод оценки белка с помощью ВСА
При рассмотрении механизма анализа BCA типичный раствор BCA содержит сильнощелочной раствор с pH около 11,25, а ингредиенты в этом растворе включают бицинхониновую кислоту, карбонат натрия, бикарбонат натрия, тартрат натрия и пентагидрат сульфата меди(II). Этот анализ в основном зависит от двух химических реакций: восстановления меди (II) до меди (I) за счет пептидных связей в белке и хелатирования двух молекул бицинхониновой кислоты с ионом меди (I), в результате чего образуется комплекс пурпурного цвета, который может поглощают свет с длиной волны 562 нм. В первой реакции количество восстановленной пептидными связями меди(II) пропорционально количеству белка в образце.
Что такое анализ Брэдфорда?
Анализ Брэдфорда - это спектроскопический аналитический метод, полезный для измерения концентрации белка в растворе. Этот метод был разработан Мэрион М. Брэдфорд в 1976 году, и это сравнительно быстрый и точный метод.
Цветная реакция белка и реагента Брэдфорда
Мы можем использовать этот метод для определения концентрации количества белка в образце. Химическая реакция, происходящая в образце во время этого анализа, зависит исключительно от аминокислотного состава белка в образце.
Метод Брэдфорда для оценки белков
При рассмотрении метода этого анализа, это колориметрический анализ белка, который основан на сдвиге поглощения красителя Кумасси бриллиантового синего G-250. Как правило, этот краситель существует в трех формах: анионная (синяя) форма, нейтральная (зеленая) форма и катионная (красная) форма. Поэтому в кислых условиях краситель меняет свой цвет с красного на синий. Это происходит из-за связывания белка с красителем. Напротив, если белок не связывается с красителем, изменения окраски не происходит, раствор приобретает красно-коричневый цвет. Этот краситель способен образовывать прочный нековалентный комплекс с карбоксильной группой белка за счет сил Ван-дер-Ваальса и электростатического притяжения.
В чем разница между BCA и анализом Брэдфорда?
BCA и анализ Брэдфорда представляют собой два метода анализа для определения концентрации белка. Эти два анализа имеют разные принципы анализа и различия в их точности. Ключевое различие между BCA и анализом Брэдфорда заключается в том, что анализ BCA требует много времени и менее точен, тогда как анализ Брэдфорда быстрый и точный.
Следующая инфографика суммирует различия между анализом BCA и тестом Брэдфорда в табличной форме.
Резюме – BCA против Bradford Assay
Анализ BCA или анализ на бицинхониновую кислоту представляет собой биохимический анализ, полезный для определения общей концентрации белка в растворе. Анализ Брэдфорда представляет собой спектроскопический аналитический метод, полезный для измерения концентрации белка в растворе. Ключевое различие между анализом BCA и анализом Брэдфорда заключается в том, что анализ BCA занимает много времени и менее точен, тогда как анализ Брэдфорда является быстрым и точным..
