Ключевая разница - векторы YAC и BAC
Векторы используются в молекулярном клонировании. Вектор можно определить как молекулу ДНК, которая ведет себя как средство переноса чужеродного генетического материала в другую клетку. Вектор, содержащий чужеродную ДНК, известен как рекомбинантная ДНК, и он должен обладать способностью реплицироваться и экспрессироваться в организме-хозяине. Дрожжевая искусственная хромосома (YAC) и бактериальная искусственная хромосома (BAC) представляют собой два типа векторов, участвующих в клонировании. Ключевое различие между YAC и BAC заключается в том, что YAC представляет собой искусственно сконструированную векторную систему, использующую определенный участок дрожжевой хромосомы для встраивания больших сегментов генетического материала в клетки дрожжей, в то время как BAC представляет собой искусственно сконструированную векторную систему, использующую определенный участок E.coli для встраивания больших сегментов ДНК в клетки E. coli.
Что такое векторы YAC?
YAC (Искусственная хромосома дрожжей) представляет собой искусственно созданную хромосому, которая способна нести большой сегмент чужеродной ДНК и реплицироваться в клетках дрожжей. Он имеет центромеру, теломеры, а также автономно реплицирующиеся последовательности, которые необходимы для репликации и стабильности. YAC также должен нести селективный маркер или маркеры и сайты рестрикции, чтобы сделать его эффективным клонирующим вектором. Большая последовательность размером от 1000 до 2000 т.п.н. может быть вставлена в YAC и перенесена в дрожжи. Эффективность преобразования YAC очень низкая.
Рисунок 01: Вектор YAC
Что такое векторы BAC?
Бактериальная искусственная хромосома (ВАС) - это искусственно сконструированная хромосома для молекулярного клонирования. Он имеет определенные участки плазмиды E. coli F, он круглый и суперскрученный. BAC разработан для клонирования фрагментов ДНК бактерий, особенно E. coli. Он может нести фрагменты ДНК размером до 300 т.п.н. По сравнению с YAC, вставки для клонирования BAC имеют меньшие размеры. BAC были разработаны в 1992 году и до сих пор популярны благодаря своей стабильности и простоте конструкции. BAC также полезны при разработке вакцин.
Рисунок 02: BAC Vector в молекулярном клонировании
В чем разница между векторами YAC и BAC?
YAC vs BAC Vectors |
|
| YAC представляет собой генетически сконструированную хромосому с использованием ДНК дрожжей с целью клонирования. | BAC представляет собой генетически модифицированную молекулу ДНК с использованием ДНК кишечной палочки для целей клонирования. |
| Пол | |
| YAC были разработаны для клонирования больших фрагментов геномной ДНК в дрожжи. | БАК были разработаны для клонирования больших геномных фрагментов в Escherichia coli. |
| Длина вставки | |
| YAC могут содержать геномные вставки размером в мегабайты (1000–2000 кб). | BAC могут содержать вставки размером 200–300 КБ или меньше. |
| Строительство | |
| ДНК YAC трудно очистить в неизменном виде, и для создания векторной системы YAC требуется высокая концентрация. | BAC легко очищается и легко конструируется. |
| Химеризм | |
| YAC часто химеричны. | БАК редко бывают химерными. |
| Стабильность | |
| YAC нестабилен. | BAC стабилен. |
| Модификации | |
| Рекомбинация дрожжей вполне осуществима и всегда остается активной. Следовательно, он может генерировать удаления и другие перестановки в YAC. | Е. coli предотвращается и включается при необходимости. Следовательно, это уменьшает нежелательные перестройки в BAC. |
| Техническое обслуживание | |
| Манипулирование рекомбинантными YAC обычно требует переноса YAC в E. coli для последующего манипулирования. Следовательно, это трудоемкий процесс. | ВАС модификация происходит непосредственно в E. coli. Так что нет необходимости в переносе ДНК. Следовательно, процесс не трудоемкий. |
Резюме – YAC vs BAC Vectors
YAC стал важным исследовательским инструментом в процессах клонирования благодаря своей способности клонировать большие фрагменты ДНК в организм-хозяин. Однако YAC как векторы имеют несколько недостатков, таких как трудности построения, химеризм, нестабильность и т. Д. Поэтому, чтобы преодолеть эти проблемы, ученые разработали векторы BAC. BAC был сконструирован с использованием определенных участков хромосомы E. coli. Это стабильный вектор, и его легко построить. Однако длина ДНК, с которой может справиться BAC, в 20 раз меньше, чем у YAC. В этом разница между векторными системами YAC и BAC. В настоящее время BAC предпочтительнее YAC в лабораториях.
