Ключевая разница – ВЭЖХ и ВЭТСХ
Основное различие между ВЭЖХ и ВЭТСХ заключается в том, что ВЭЖХ позволяет проводить количественное разделение компонентов в образце, тогда как ВЭТСХ не позволяет проводить количественное разделение компонентов в образце.
Хроматография - это метод физического разделения, который используется для разделения и идентификации компонентов в смеси. И ВЭЖХ, и ВЭТСХ являются хроматографическими методами. ВЭЖХ – это высокоэффективная жидкостная хроматография. ВЭТСХ - это высокоэффективная тонкослойная хроматография.
Что такое ВЭЖХ?
ВЭЖХ – это высокоэффективная жидкостная хроматография. Это аналитический метод, используемый для разделения, идентификации и количественного определения компонентов в смеси. В этом методе образец растворяют в подходящем растворителе. Затем растворитель с образцом пропускают через насос с заданным давлением. Насос заполнен твердым адсорбирующим материалом. Затем некоторые компоненты прочно связываются с абсорбирующим материалом, тогда как другие компоненты связываются слабо. Это приводит к тому, что компоненты имеют разные скорости потока через насос. Поэтому компоненты можно легко разделить.
Рисунок 01: Система ВЭЖХ
Адсорбирующий материал, заполняющий насос, известен как стационарная фаза. Растворитель с растворенным образцом известен как подвижная фаза. Насос, используемый в этом методе, называется колонкой. Колонка заполнена адсорбирующим материалом, чаще всего частицами кремнезема. Размер этих частиц может составлять от 2 до 50 мкм. На процесс разделения влияет состав подвижной фазы и температура системы. Взаимодействия между неподвижной фазой и компонентом в образце могут быть гидрофобными взаимодействиями, диполь-дипольными взаимодействиями, ионными связями и т. д.
Рабочее давление ВЭЖХ значительно выше, чем у традиционной жидкостной хроматографии. Оно лежит в районе 50-350 бар. Разница между жидкостной хроматографией и ВЭЖХ заключается в том, что при жидкостной хроматографии образец падает через колонку под действием силы тяжести, тогда как при ВЭЖХ образец проходит через колонку под давлением. Размер колонки и частиц абсорбента также очень малы по сравнению с традиционной жидкостной хроматографией. Однако разрешение, даваемое методом ВЭЖХ, выше.
Что такое ВЭТСХ?
ВЭТСХ – это высокоэффективная тонкослойная хроматография. Это усовершенствованная и автоматизированная форма традиционной ТСХ. Этот метод обеспечивает эффективное разрешение за короткий период времени. В этом методе анализа образец и эталон могут анализироваться одновременно, что позволяет сравнивать образец с эталоном. Это дает улучшенную аналитическую точность, чем другие хроматографические методы. Время на анализ меньше. Это недорогой метод.
Рисунок 02. Анализ пищевых красителей с помощью ВЭТСХ
Метод ВЭТСХ является простым процессом, и этап подготовки образца также исключается (в традиционной ТСХ этап подготовки образца включается перед разделением. Этот этап включает очистку и обогащение). Растворитель можно использовать непосредственно без какой-либо предварительной обработки, хотя другие хроматографические методы требуют предварительной обработки, такой как дегазация, фильтрация и т. д.
Адсорбирующий материал, используемый в ВЭТСХ, представляет собой диоксид кремния с частицами очень малого размера. В традиционной ТСХ размер частиц кремнезема составляет 5-20 мкм, тогда как в ВЭТСХ он составляет 4-8 мкм. Образец наносится на пластину ВЭТСХ с помощью аппликатора. Это дает равномерное и безопасное применение. Затем планшеты помещают в камеру с подвижной фазой. Камера должна быть насыщена парами подвижной фазы. После процесса ВЭТСХ пятна, которые переместились, могут быть обнаружены. При обнаружении пятен на пластине в методе ВЭТСХ используется подходящий УФ-диапазон или йодная камера.
В чем разница между ВЭЖХ и ВЭТСХ?
ВЭЖХ и ВЭТСХ |
|
| ВЭЖХ – это высокоэффективная жидкостная хроматография. | ВЭТСХ – это высокоэффективная тонкослойная хроматография. |
| Техника | |
| В ВЭЖХ подвижная фаза с растворителем пропускается через колонку, заполненную неподвижной фазой. | В ВЭТСХ образец наносится на пластину для ТСХ и помещается в камеру, содержащую подвижную фазу; затем образец мигрирует вверх по пластине вместе с подвижной фазой. |
| Измерение | |
| В ВЭЖХ разница между расходами компонентов через колонку используется для разделения компонентов в образце. | В ВЭТСХ разница между расстояниями, пройденными каждым компонентом в образце, используется для разделения компонентов в образце. |
| Количественное разделение | |
| ВЭЖХ позволяет количественно разделить компоненты в образце. | ВЭТСХ не позволяет проводить количественное разделение компонентов в образце. |
Резюме – ВЭЖХ и ВЭТСХ
ВЭЖХ и ВЭТСХ представляют собой два хроматографических метода. Основное различие между ВЭЖХ и ВЭТСХ заключается в том, что ВЭЖХ позволяет проводить количественное разделение компонентов в образце, тогда как ВЭТСХ не позволяет проводить количественное разделение компонентов в образце.
