Ключевое различие между CLIA и ECLIA заключается в том, что CLIA использует химический метод для генерации хемилюминесценции, а ECLIA использует электрохимический метод для генерации сигналов хемилюминесценции в методе иммуноанализа.
Иммуноанализы широко используются для идентификации и количественного определения белков, связанных с заболеваниями или инфекциями. Поэтому они в первую очередь опираются на концепцию связывания антитело-антиген. Существует множество типов иммунологических анализов, и хемилюминесцентный иммуноанализ является одним из таких новых методов разработки. И CLIA, и ECLIA используют хемилюминесцентные индикаторы.
Что такое CLIA?
Хемилюминесцентный иммуноанализ (ХЛИА) - это тип иммунологического анализа, в котором для обнаружения используется люминесцентная молекула. Люминесценция, испускаемая молекулой, регистрируется на спектрофотометре, как правило, при длине волны от 300 до 800 нм. Хемилюминесценция вызывает возбуждение атомов, и этот метод определяет экзергонические химические реакции как наиболее подходящий источник энергии для возбуждения.
Техника CLIA осуществляется двумя основными методами: прямым методом CLIA и косвенным методом CLIA. В прямой методике CLIA используются прямые люминофорные маркеры, которые связаны с мишенью, тогда как в непрямой методике CLIA используются ферментативные маркеры. Прямые люминофорные маркеры включают эфиры ацидума и рутения, тогда как непрямые маркеры включают щелочную фосфатазу с субстратом адамантил-1,2-диоксетанарилфосфата (AMPPD) и пероксидазу хрена с люминолом или его производными в качестве субстрата.
Рисунок 01: Хемилюминесценция
Ключевыми преимуществами CLIA являются широкий динамический диапазон функций, высокая интенсивность доставки сигнала, отсутствие фоновых помех, высокая специфичность, быстрота, стабильность и совместимость с различными протоколами анализа. Напротив, их высокая стоимость и ограничения в отношении обнаружения антигена и тест-панелей являются недостатками CLIA.
Что такое ECLIA?
Электрохемилюминесцентный иммуноанализ (ELCIA) - это новый метод разработки иммуноанализа, в котором используется концепция электрохемилюминесценции. В концепции электролюминесценции промежуточные продукты генерируются электрохимически. Эти промежуточные продукты, генерируемые электронным способом, затем достигают возбужденного состояния и приводят к излучению света. Длина волны, на которой излучается свет, соответствует энергетической щели. Таким образом, хемилюминесценция возникает благодаря электрохимическому образованию одного или нескольких реагентов на электроде.
ECLIA - полезное аналитическое приложение с высокой чувствительностью и специфичностью. Он в основном используется для идентификации белков, связанных с различными патологическими и медицинскими состояниями. К его основным преимуществам относятся более широкий динамический диапазон, универсальность, пространственное и временное управление за счет применения электродных потенциалов, высокая чувствительность вплоть до пикомолярных диапазонов. Однако тот факт, что он требует профессионального обращения и связанной с этим высокой стоимости, является его недостатком.
В чем сходство между CLIA и ECLIA?
- Оба метода основаны на концепции связывания антиген-антитело.
- Более того, оба в основном используются для диагностики заболеваний на основе количественного определения белка.
- Оба метода являются чувствительными и специфическими.
- Они используют концепцию хемилюминесценции для обнаружения.
- Их можно автоматизировать.
- Для обнаружения обоих требуется спектрофотометр.
- Оба имеют широкий динамический диапазон.
- Это дорогостоящие методы.
В чем разница между CLIA и ECLIA?
ХЛИА - это метод иммунологического анализа, в котором используется теория хемилюминесценции, а ЭХЛИА - это метод иммунного анализа, в котором используется теория электрохимии в сочетании с хемилюминесценцией. Итак, в этом ключевое отличие CLIA от ECLIA. Таким образом, CLIA использует химические реакции, которые приводят к развитию хемилюминесцентных сигналов, а ECLIA использует электрохимические реакции, которые приводят к развитию хемилюминесцентных сигналов.
Приведенная ниже инфографика различий между CLIA и ECLIA показывает больше сравнений между обоими методами.
Резюме – CLIA против ECLIA
ХЛИА и ЭХЛИА – оба метода играют важную роль в диагностике заболеваний. Это передовые методы иммунодиагностики, основанные на концепции связывания антител с антигенами. Ключевое различие между CLIA и ECLIA заключается в методе генерации хемилюминесценции. В то время как CLIA использует химические реакции для создания хемилюминесценции после связывания антитела с антигеном, ECLIA использует электрохимические реакции для создания хемилюминесценции. Однако оба метода являются быстрыми и специфичными.