Основное различие между радиоиммуноанализом и иммунорадиометрическим анализом заключается в том, что в радиоиммуноанализе образец или соединение, подлежащее измерению, объединяют с радиоактивным антигеном перед комбинацией, в то время как в иммунорадиометрическом анализе образец или соединение немедленно соединяется с радиоактивно меченым антигеном. антитела.
Иммуноанализ – это биохимический тест, определяющий наличие или концентрацию макромолекул в растворе с использованием антител или антигенов. Флуоресцентные и радиоактивные антитела используются для измерения антигенов в образце. Первоначально антитела использовались в методах преципитации, таких как иммунопреципитация, иммунодиффузия и иммуноэлектрофорез для анализа белков сыворотки. В настоящее время высокочувствительные методы, такие как радиоиммуноанализ и иммунорадиометрические анализы, используются для измерения лекарств, онкомаркеров и гормонов.
Что такое радиоиммуноанализ?
Радиоиммуноанализ (РИА) – это иммуноанализ, в котором радиоактивные элементы используют поэтапное образование комплексов антиген-антитело. РИА обычно использует радиоактивные антитела для определения количества антигена в образце. РИА является очень специфичным и высокочувствительным методом in vitro. В основе RIA лежит принцип конкурентного связывания. Здесь радиоактивный антиген конкурирует с нерадиоактивным антигеном за постоянное количество сайтов связывания антител или рецепторов. РИА требует специального лицензирования и мер предосторожности, поскольку используются радиоактивные вещества, и он остается одним из наименее дорогих методов.
Рисунок 01: Иммуноанализ
Во время РИА известное количество антигена часто становится радиоактивным путем мечения его гамма-радиоактивными изотопами йода, присоединенными к тирозину. Затем этот антиген объединяют с известным количеством антитела. Здесь и антиген, и антитело специфически связываются друг с другом. Затем добавляют образец сыворотки крови, чтобы инициировать конкурентную реакцию между мечеными антигенами и немечеными антигенами в сыворотке со специфическими антителами. В этой реакции антитела выделяют определенное количество меченого антигена. Это количество пропорционально отношению меченого антигена к немеченому. Наконец, создается кривая связывания для определения количества антигена в сыворотке крови пациента.
Что такое иммунорадиометрический анализ?
Иммунорадиометрический анализ (IRMA) - это иммунологический анализ, в котором используются антитела, меченные радиоактивным изотопом. В IRMA антитела метят с помощью радиоизотопов. Эти антитела связываются с антигенами, присутствующими в конкретном образце. В положительном образце антитела с радиоактивной меткой связываются со свободными эпитопами антигенов. Это формирует комплекс антиген-антитело.
Во время второй реакции несвязанные меченые антитела удаляют с помощью твердофазного антигена. Оставшееся количество радиоактивных антител в растворе находится в прямой зависимости от концентрации антигена. IRMA известен как анализ избытка реагента, при котором в качестве реагента используется избыточное количество меченного радиоактивным изотопом антитела. Здесь допускается реакция избыточной концентрации меченого антитела или антигена. На заключительном этапе разделяются антигенсвязанные и свободные антитела, а антигенсвязанная фракция подвергается радиоактивному анализу. Здесь активность фракции прямо пропорциональна концентрации антигена.
Каковы сходства между радиоиммуноанализом и иммунорадиометрическим анализом?
- И радиоиммуноанализ, и иммунорадиометрический анализ являются иммуноанализами, в которых используются радиоактивные элементы для поэтапного образования комплексов антиген-антитело.
- Они образуют комплекс антиген-антитело.
В чем разница между радиоиммуноанализом и иммунорадиометрическим анализом?
Радиоиммуноанализ представляет собой иммуноанализ, который определяет уровни антител с помощью антигена, меченного радиоизотопом, в то время как иммунорадиометрический анализ представляет собой анализ избытка реагента, в котором используется избыточная концентрация меченного радиоактивным изотопом антитела. Таким образом, в этом ключевое различие между радиоиммуноанализом и иммунорадиометрическим анализом. ИРМА способна обеспечить более высокую чувствительность, чем РИА. В RIA антигены метят гамма-радиоактивными изотопами йода, а в IRMA антитела метят изотопами йода. Таким образом, это также разница между радиоиммуноанализом и иммунорадиометрическим анализом. Поскольку IRMA представляет собой метод с избытком реагентов, анализ выполняется за более короткое время, чем RIA.
В следующей таблице приведены различия между радиоиммуноанализом и иммунорадиометрическим анализом.
Резюме – Сравнение радиоиммуноанализа и иммунорадиометрического анализа
Радиоиммуноанализ – это иммуноанализ, в котором для определения уровней антител используются радиоактивные элементы в поэтапном формировании. РИА обычно использует радиоактивные антитела. Радиоактивный антиген конкурирует с нерадиоактивным антигеном за постоянное количество сайтов связывания антител или рецепторов. Иммунорадиометрический анализ представляет собой иммуноанализ, проводимый для определения уровней антигена в образце с использованием антител, меченных радиоактивным изотопом. Эти антитела связываются с антигенами, присутствующими в конкретном образце. В конце каждого анализа образуется комплекс антиген-антитело. Для получения результатов анализов строится кривая связывания. В радиоиммуноанализе количество меченого антигена пропорционально отношению меченого антигена к немеченому, но в иммунорадиометрическом анализе активность связанной с антигеном фракции прямо пропорциональна концентрации антигена. Это краткое изложение различий между радиоиммуноанализом и иммунорадиометрическим анализом.
