Ключевое различие между иммунопреципитацией и коиммунопреципитацией заключается в том, что иммунопреципитация - это метод, при котором белок из раствора осаждается с использованием специфического антитела, а коиммунопреципитация - это метод, при котором интактные белковые комплексы осаждаются из раствора с использованием специфического антитела.
Взаимодействие антиген-антитело - это специфическое химическое взаимодействие между антителами, вырабатываемыми В-клетками, и антигенами (белками) во время иммунной реакции. Обычно растворимые антигены объединяются с растворимыми антителами в присутствии электролита при растворимой температуре и рН с образованием нерастворимого видимого комплекса. Это называется реакцией осаждения. Следовательно, иммунопреципитация и коиммунопреципитация - это два типа реакций преципитации, которые обычно используются в лабораториях для идентификации белков, таких как антигены.
Что такое иммунопреципитация?
Иммунопреципитация – это метод осаждения белка из раствора с использованием специфического антитела. Иногда этот метод также известен как иммунопреципитация отдельных белков. Иммунопреципитация использует антитела для выделения выбранного интересующего белка из клеточного лизата. Антитело очищает свой специфический белок-мишень или антиген из смеси. Антитело связывается с белком, и комплекс антитело-антиген вытягивается из образца. В экспериментальной установке комплекс антиген-антитело извлекается с использованием агарозы, связанной с белком A/G, или магнитных шариков. Позже шарики промывают и элюируют интересующий белок. Очищенный белок или антиген, полученные путем иммунопреципитации, проверяют различными методами, такими как твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA) и вестерн-блоттинг (WB).
Рисунок 01: Иммунопреципитация
Кроме того, выделенные белки или антигены могут быть количественно определены и идентифицированы с помощью масс-спектрометрии с использованием моделей ферментативного расщепления на основе первичной последовательности. Прежде чем начать эксперимент по иммунопреципитации, следует принять во внимание определенные соображения: выбор формата метода, связывание белков и гранул, выбор правильного первичного антитела и изотипа, а также отрицательный контроль..
Что такое коиммунопреципитация?
Коиммунопреципитация – это метод осаждения интактных белковых комплексов из раствора с использованием специфического антитела. Коиммунопреципитация обычно работает путем выбора специфического антитела, нацеленного на известный белок (антиген), который считается членом более крупного комплекса белков. Нацеливая на известного члена специфическое антитело, можно извлечь весь белковый комплекс из раствора. Это позволяет идентифицировать неизвестных членов комплекса. Концепция вытягивания белковых комплексов из раствора иногда называется механизмом «вытягивания вниз».
Рисунок 02: B Коиммунопреципитация
Коиммунопреципитация - это мощный метод, который используется для анализа межбелковых взаимодействий. Основной целью коиммунопреципитации является идентификация взаимодействующих партнеров, таких как лиганды, кофакторы или сигнальные молекулы интересующего белка. Кроме того, коиммунопреципитация является эффективным методом, который используется для выделения белков из сыворотки, клеточного лизата, гомогенизированной ткани или кондиционированной среды.
Каковы сходства между иммунопреципитацией и коиммунопреципитацией?
- Иммунопреципитация и коиммунопреципитация представляют собой два типа методов, основанных на реакции преципитации.
- Оба метода могут использоваться для идентификации целевого антигена с помощью специфического антитела.
- Оба метода сильно зависят от взаимодействия антиген-антитело.
- Они обычно используются в клинических лабораториях.
В чем разница между иммунопреципитацией и коиммунопреципитацией?
Иммунопреципитация - это метод, при котором белок осаждается из раствора с использованием специфического антитела, а коиммунопреципитация - это метод, при котором интактные белковые комплексы осаждаются из раствора с использованием специфического антитела. Таким образом, в этом ключевое различие между иммунопреципитацией и коиммунопреципитацией. Кроме того, иммунопреципитация чаще используется в лабораториях, тогда как коиммунопреципитация обычно не используется в лабораториях.
Приведенная ниже инфографика представляет различия между иммунопреципитацией и коиммунопреципитацией в табличной форме для параллельного сравнения.
Резюме – Иммунопреципитация и коиммунопреципитация
Иммунопреципитация и коиммунопреципитация представляют собой два типа методов, основанных на реакции преципитации, которые зависят от взаимодействия антиген-антитело. Метод иммунопреципитации осаждает белок из раствора с использованием специфического антитела, тогда как метод коиммунопреципитации осаждает интактные белковые комплексы из раствора с использованием специфического антитела. Итак, это суммирует разницу между иммунопреципитацией и коиммунопреципитацией.
