Ключевое различие между клонирующим вектором и вектором экспрессии заключается в том, что клонирующий вектор переносит фрагмент чужеродной ДНК в клетку-хозяина, в то время как вектор экспрессии способствует экспрессии генов в белки.
Вектор - важный термин в молекулярной биологии. В технологии рекомбинантной ДНК основная роль вектора заключается в обеспечении способа транспорта полезной фракции ДНК для встраивания в клетку-хозяина. Более того, это молекула ДНК, используемая для искусственного переноса фрагмента чужеродной ДНК в клетку-хозяина для экспрессии или репликации. Наиболее часто используемыми векторами являются плазмиды, вирусные векторы, космиды и искусственные хромосомы. Вектор клонирования и экспрессионный вектор представляют собой два типа векторов, классифицируемых в зависимости от их применения.
Что такое клонирующий вектор?
Клонирующий вектор представляет собой фракцию ДНК, которая может быть использована для вставки чужеродной молекулы ДНК и может быть вставлена в хозяина для целей клонирования. Идеальной характеристикой клонирующего вектора является простота вставки/удаления фрагмента ДНК путем обработки ферментами рестрикции и лигирования. В этом аспекте часто используемыми клонирующими векторами являются генно-инженерные плазмиды.
Рисунок 01: Клонирование вектора
Клонирующий вектор должен иметь сайт множественного клонирования, селективный маркерный ген и репортерный ген. Цель сайта клонирования - предоставить место для клонирования. Селектируемый маркерный ген помогает идентифицировать успешные рекомбинанты после клонирования, а репортерный ген позволяет проводить скрининг и идентифицировать правильный рекомбинант среди рекомбинантов после клонирования. Клонирующий вектор не обязательно способствует экспрессии белка, кодируемого чужеродной ДНК. Таким образом, единственной целью клонирующего вектора является перенос чужеродной ДНК к хозяину.
Что такое вектор выражения?
Экспрессионный вектор, также называемый экспрессионной конструкцией, представляет собой тип вектора, используемого для экспрессии белков внутри клетки-хозяина. Как и любой вектор, он также должен содержать основные части: сайт множественного клонирования, маркерный ген и репортерный ген. Вектор вводит новый ген в хозяина и, используя механизм синтеза белка хозяина, позволяет экспрессировать ген в хозяине. Более того, его первоначальная цель состоит в том, чтобы создать стабильную м-РНК и тем самым создать белки. Одним из хороших примеров является коммерческое производство инсулина. Ген инсулина вводят в бактериальную плазмиду и встраивают обратно в E.coli, позволяя размножаться плазмидам и позволяя E. coli расти, выделяя инсулин, который можно собирать и использовать.
Рисунок 02: Вектор выражения
Кроме того, вектор экспрессии должен иметь сильную промоторную область, правильную последовательность инициации трансляции и правильный терминаторный кодон и последовательность. Векторы экспрессии имеют множество применений для получения пептидов и белков для фармацевтической промышленности, таких как производство инсулина, гормона роста, антибиотиков, вакцин, антител. Кроме того, векторы экспрессии помогают в производстве ферментов в пищевой и швейной промышленности. Мало того, векторы экспрессии необходимы для получения трансгенных растений, таких как золотой рис, растения, устойчивые к насекомым, растения, устойчивые к гербицидам и т. д.
Каковы сходства между вектором клонирования и вектором экспрессии?
- Клонирующий вектор и вектор экспрессии - это два типа векторов, которые мы используем в технологии рекомбинантной ДНК и генной инженерии.
- Оба содержат маркерный ген и репортерный ген.
- Кроме того, они состоят из нескольких сайтов клонирования.
- Кроме того, у них есть источник репликации и способность к саморепликации.
В чем разница между вектором клонирования и вектором экспрессии?
Клонирующий вектор представляет собой небольшую молекулу ДНК, которая переносит фрагмент чужеродной ДНК в клетку-хозяина, в то время как вектор экспрессии представляет собой тип вектора, облегчающий введение, экспрессию генов и продукцию белков. Итак, в этом ключевое различие между вектором клонирования и вектором экспрессии. Кроме того, еще одно существенное различие между клонирующим вектором и вектором экспрессии заключается в том, что клонирующий вектор вводит фрагмент чужеродной ДНК в хозяина, в то время как экспрессионные векторы экспрессируют введенный ген, продуцируя соответствующий белок.
Кроме того, клонирующий вектор состоит из точки начала репликации, сайтов рестрикции и селектируемого маркера. При этом вектор экспрессии содержит энхансеры, промоторную область, кодон терминации, последовательность инициации транскрипции, точку начала репликации, сайты рестрикции и селектируемый маркер. Следовательно, в этом также заключается разница между вектором клонирования и вектором экспрессии. Кроме того, примерами клонирующих векторов являются плазмиды, бактериофаги, искусственные хромосомы бактерий, космиды, искусственные хромосомы млекопитающих, искусственные хромосомы дрожжей и т.д. Между тем, векторы экспрессии в основном представляют собой плазмиды.
Резюме – вектор клонирования против вектора экспрессии
В зависимости от их функции в молекулярной биологии существует два типа векторов: вектор клонирования и вектор экспрессии. Клонирующий вектор представляет собой небольшую молекулу ДНК, которая доставляет чужеродную ДНК в клетку-хозяина. Существуют различные типы клонирующих векторов, такие как плазмиды, бактериофаги, бактериальные искусственные хромосомы, космиды и искусственные хромосомы млекопитающих. Напротив, вектор экспрессии представляет собой плазмиду, которая вводит интересующий ген в клетку-хозяина и способствует экспрессии гена для получения белкового продукта. Векторы экспрессии представляют собой плазмиды. Таким образом, это краткое изложение различий между вектором клонирования и вектором экспрессии.
