Ключевая разница – проточная цитометрия и FACS
В контексте клеточной теории клетки являются основной структурной и функциональной единицей всех живых организмов. Сортировка клеток - это методология, используемая для разделения различных клеток в соответствии с физиологическими и морфологическими признаками. Они могут иметь внутриклеточные или внеклеточные характеристики. Взаимодействие ДНК, РНК и белков рассматривается как внутриклеточные интерактивные свойства, тогда как форма, размер и различные поверхностные белки рассматриваются как внеклеточные свойства. В современной науке методологии сортировки клеток помогли в различных исследованиях в области биологии, а также в установлении новых принципов посредством исследований в области медицины. Сортировка клеток проводится по различным методикам, включая как примитивные с меньшим количеством оборудования, так и передовые технологические методики с использованием сложного оборудования. Проточная цитометрия, флуоресцентно-активированная сортировка клеток (FACS), магнитная селекция клеток и сортировка отдельных клеток являются основными используемыми методологиями. Проточная цитометрия и FACS разработаны для дифференциации клеток по их оптическим свойствам. FACS - это специализированный тип проточной цитометрии. Проточная цитометрия - это методология, которая используется при анализе гетерогенной популяции клеток в соответствии с различными молекулами клеточной поверхности, размером и объемом, что позволяет исследовать отдельные клетки. FACS - это процесс, при котором образец смеси клеток сортируется в соответствии с их характеристиками светорассеяния и флуоресценции в два или более контейнеров. В этом ключевое различие между проточной цитометрией и FACS.
Что такое проточная цитометрия?
Проточная цитометрия - это метод, который используется для исследования и определения экспрессии внутриклеточных молекул и клеточной поверхности, а также для определения и характеристики различных типов клеток. Он также используется для определения объема и размера клеток, а также для оценки чистоты выделенных субпопуляций. Это позволяет проводить многопараметрическую оценку отдельных клеток примерно в одно и то же время. Проточная цитометрия используется для измерения интенсивности флуоресценции, вызванной флуоресцентно меченными антителами, которые помогают идентифицировать белки или лиганды, которые связываются с ассоциированными клетками.
Рисунок 01: Проточная цитометрия
Как правило, проточная цитометрия включает в себя в основном три подсистемы. Это флюидика, электроника и оптика. В проточной цитометрии доступны пять основных компонентов, которые используются при сортировке клеток. Это проточная ячейка (поток жидкости, который используется для их транспортировки и выравнивания ячеек для процесса оптического зондирования), система измерения (может быть различных систем, включая ртутные и ксеноновые лампы, мощные с водяным охлаждением или маломощные лазеры с воздушным охлаждением или диодные лазеры), АЦП; Система аналого-цифрового преобразователя, система усиления и компьютер для анализа. Приобретение - это процесс, при котором данные собираются из образцов с помощью проточного цитометра. Этот процесс опосредован компьютером, который связан с проточным цитометром. Программное обеспечение, установленное на компьютере, анализирует информацию, поступающую на компьютер от проточного цитометра. Программное обеспечение также позволяет настраивать параметры эксперимента, управляя проточным цитометром.
Что такое FACS?
В контексте проточной цитометрии сортировка клеток с активацией флуоресценции (FACS) представляет собой метод, который используется для дифференциации и сортировки образца смеси биологических клеток. Ячейки отделены от двух или более контейнеров. Метод сортировки основан на физических характеристиках клетки, включая светорассеяние и характеристики флуоресценции клетки. Это важный научный метод, который можно использовать для получения надежных количественных и качественных результатов сигналов флуоресценции, испускаемых каждой клеткой. Во время FACS первоначально получают заранее полученную смесь клеток; взвесь направлена в центр узкой струи жидкости, которая течет стремительно. Поток жидкости предназначен для разделения клеток в суспензии в зависимости от диаметра каждой клетки. К потоку суспензии прикладывается механизм вибрации, в результате чего образуются отдельные капли.
Рисунок 02: FACS
Система откалибрована для создания одной капли с одной ячейкой. Непосредственно перед образованием капель поток суспензии перемещается вдоль прибора для измерения флуоресценции, который регистрирует флуоресценцию, характерную для каждой клетки. В месте образования капель помещают электрическое зарядное кольцо, которое индуцирует заряд перед измерением интенсивности флуоресценции. Как только капли формируются из потока суспензии, внутри капель захватывается заряд, который затем входит в систему электростатического отклонения. В соответствии с зарядом система отводит капли в разные контейнеры. Метод применения заряда варьируется в зависимости от различных систем, используемых в FACS. Оборудование, используемое в FACS, известно как сортировщик клеток, активируемый флуоресценцией.
В чем сходство проточной цитометрии и FACS?
Проточная цитометрия и FACS разработаны для дифференциации клеток по их оптическим свойствам
В чем разница между проточной цитометрией и FACS?
Проточная цитометрия и FACS |
|
| Проточная цитометрия - это методология, которая используется при анализе гетерогенной популяции клеток в соответствии с различными молекулами клеточной поверхности, размером и объемом, что позволяет исследовать отдельные клетки. | FACS - это процесс, при котором образец смеси клеток сортируется в соответствии с их характеристиками светорассеяния и флуоресценции в два или более контейнеров. |
Резюме – Проточная цитометрия в сравнении с FACS
Клетка является основной структурной и функциональной единицей всех живых организмов. Сортировка клеток - это процесс, при котором клетки выделяют и дифференцируют в разные категории на основе их внутриклеточных и внеклеточных свойств. Проточная цитометрия и FACS являются двумя важными методологиями сортировки клеток. Оба процесса разработаны для дифференциации клеток по их оптическим свойствам. Проточная цитометрия - это методология, которая используется при анализе гетерогенной популяции клеток в соответствии с различными молекулами клеточной поверхности, размером и объемом, что позволяет исследовать отдельные клетки. FACS - это процесс, при котором образец смеси клеток сортируется в соответствии с их характеристиками светорассеяния и флуоресценции в два или более контейнеров. В этом разница между проточной цитометрией и FACS.
Загрузить PDF-версию проточной цитометрии и FACS
Вы можете загрузить PDF-версию этой статьи и использовать ее в автономном режиме в соответствии с примечанием к цитированию. Пожалуйста, загрузите PDF-версию здесь. Разница между проточной цитометрией и FACS
