Ключевое различие между электропорацией и микроинъекцией заключается в том, что электропорация - это метод, который использует электрический импульс высокого напряжения для доставки ДНК в клетки-хозяева, в то время как микроинъекция - это метод, который использует стеклянную иглу с тонким концом или микропипетку для доставки ДНК в клетки-хозяева. клетки-хозяева.
Трансформация – это процесс переноса чужеродной ДНК в клетки-хозяева. Путем трансформации можно изменить генетический состав организма. Существуют различные химические, биологические и физические методы трансформации. Некоторые из них являются прямыми методами, а некоторые - косвенными. Электропорация и микроинъекция - это два физических метода, которые являются методами прямого преобразования. Электропорация использует электрическое поле, чтобы вызвать микроскопические поры в мембранах биологических клеток, чтобы включить ДНК в клетки-хозяева. Микроинъекция, с другой стороны, доставляет ДНК напрямую с помощью микропипетки или тонкой стеклянной иглы.
Что такое электропорация?
Электропорация - это метод трансформации, при котором ДНК доставляется в растительные клетки и протопласты. Этот метод использует электрический импульс высокого напряжения. Растительные материалы инкубируют в буферном растворе, содержащем ДНК. Затем на раствор воздействуют электрическим импульсом высокого напряжения. В клеточных мембранах растений создаются поры, индуцированные высоким напряжением, и через эти поры ДНК мигрирует внутрь клеток и интегрируется с геномной ДНК растений. Эффективность этого метода зависит от растительного сырья и условий обработки.
Рисунок 01: Электропорация
Когда трансформация осуществляется с помощью электропорации, только от 40 до 50 % клеток получают ДНК. Более того, только 50 % трансформированных клеток могут выжить при этом методе. Однако этот метод прост в исполнении и не изменяет биологическую структуру или функцию клеток. Более того, его можно использовать для широкого спектра ячеек.
Что такое микроинъекция?
Микроинъекция - это метод трансформации, который особенно полезен при введении ДНК в большие клетки. В этом методе используется стеклянная игла с тонким концом или микропипетка для доставки ДНК в протопласты растений или клетки животных (ооциты, яйца и эмбрионы). На самом деле этот метод больше подходит для создания трансгенных животных, таких как мыши. В этом методе ДНК встраивается непосредственно в ядро или цитоплазму.
Как и электропорация, микроинъекция представляет собой метод прямой трансформации. Микроинъекция выполняется под специальной установкой микроскопа. Компьютеризированное управление пипеткой, иглой, предметным столиком микроскопа и видеотехнологией повысило эффективность этой техники. При инъекции ДНК можно использовать краситель, чтобы легко идентифицировать трансформированные клетки. Поэтому нет необходимости использовать отдельный метод для идентификации трансформированных клеток. Самое главное, что для процедуры микроинъекции не требуется маркерный ген.
Рисунок 02: Микроинъекция
Кроме того, этот метод очень эффективен и воспроизводим. Однако этот способ является дорогостоящим, трудоемким и требует квалифицированного персонала. Кроме того, этим методом можно обработать лишь небольшое количество клеток.
Каковы сходства между электропорацией и микроинъекцией?
- И электропорация, и микроинъекция являются двумя типами методов трансформации.
- Эти методы доставляют ДНК в растительные клетки и протопласты.
- Это прямые методы.
- Причем, это физические или механические методы.
- Оба метода полезны при получении трансгенных растений и животных.
В чем разница между электропорацией и микроинъекцией?
Техника электропорации использует электрическое поле для введения ДНК, в то время как техника микроинъекции представляет собой микропипетку или стеклянную иглу с тонким наконечником для введения ДНК. Таким образом, в этом ключевое отличие электропорации от микроинъекции. Кроме того, электропорация в основном используется для клеток растений и протопластов, а микроинъекция - для клеток животных. Кроме того, электропорация не так трудоемка, как микроинъекция.
Приведенная ниже инфографика суммирует различия между электропорацией и микроинъекцией в табличной форме.
Резюме – Электропорация против микроинъекции
Электропорация и микроинъекция – два физических метода переноса генов. Электропорация использует электрическое поле высокого напряжения, в то время как микроинъекция использует стеклянную иглу или микропипетку. Таким образом, в этом ключевое отличие электропорации от микроинъекции. Однако оба метода напрямую вводят экзогенную ДНК в клетки-хозяева.
