Ключевое различие между ИФА и вестерн-блоттингом заключается в том, что ИФА или иммуноферментный анализ - это диагностический инструмент, который определяет, подвергался ли пациент воздействию определенного типа вируса или другого инфекционного агента, в то время как вестерн-блоттинг - это метод, который обнаруживает определенный белок в образце белка.
СПИД стал глобальной проблемой, и заболеваемость этой смертельной болезнью резко возросла за последние несколько десятилетий. Тесты на ВИЧ определяют наличие вируса иммунодефицита человека ((ВИЧ), который вызывает этот синдром. Из различных тестов на ВИЧ сегодня очень популярны ИФА и Вестерн-блот.. Это иммуноферментный анализ, используемый для выявления антител к ВИЧ. Вестерн-блот выявляет специфический белок из белковой смеси с помощью меченого антитела.
Ключевое отличие
1. Обзор и ключевые отличия
2. Что такое Элиза
3. Что такое вестерн-блот
4. Сходства между Элизой и вестерн-блоттингом
5. Сравнение бок о бок - Элиза и Вестерн-блот в табличной форме
6. Резюме
Что такое Элиза?
ИФА, расшифровывающийся как иммуноферментный анализ, был первым тестом, разработанным в первую очередь для выявления ВИЧ. Это анализ на основе планшета. Он используется для выявления антител к ВИЧ, и этот тест показывает высокую чувствительность. В этом методе антигены в образце связываются с иммобилизованными антителами на твердой поверхности. После иммобилизации антигены образуют комплексы с антителами, связанными с ферментами. Затем эти конъюгированные ферменты инкубируют с соответствующим субстратом.
Рисунок 01: ИФА
Реакция фермент-субстрат дает измеряемый окрашенный продукт. Измеряя количество продукта, можно количественно определить количество антигенов, присутствующих в образце. Таким образом, ИФА - очень специфический и сложный метод, требующий внимания высококвалифицированных специалистов. Кроме того, это трудоемкий процесс, требующий современного оборудования.
Что такое вестерн-блоттинг?
Вестерн-блоттинг - это метод, который позволяет обнаруживать определенный белок из белковой смеси. Вестерн-блоттинг представляет собой мембрану, используемую во время процедуры блоттинга для получения зеркального отображения структуры белков в SDS-полиакриламидном геле. Мембрана, используемая для вестерн-блоттинга, в основном состоит из нитроцеллюлозы или поливинилидендифторида (ПВДФ). Мембрану с перенесенным белком можно использовать для идентификации конкретного белка. Для обнаружения желаемого белка путем гибридизации требуется высококачественное антитело. Антитело связывается со своим специфическим антигеном и выявляет присутствие желаемого антигена, которым является белок.
Рисунок 02: Вестерн-блот
Перенос белков из SDS-полиакриламидного геля на вестерн-блоттинг осуществляют с помощью электроблоттинга. Это эффективный и быстрый метод, который вызывает электрофорез белков из геля и переход на нитроцеллюлозную мембрану (вестерн-блоттинг).
Вестерн-блоттинг полезен для обнаружения анти-ВИЧ-антител в образце сыворотки крови человека. Вестерн-блот также можно использовать в качестве подтверждающего теста на инфекцию гепатита В и окончательного теста на коровье бешенство.
В чем сходство между Elisa и вестерн-блоттингом?
- Элиза и вестерн-блот – два типа методов, используемых для диагностики ВИЧ.
- Оба метода основаны на иммунодетекции.
- В их основе лежит образование комплекса антитело-белок.
- Оба метода могут анализировать белки.
- Элайза и вестерн-блоттинг требуют много времени.
- Для выполнения этих методов требуется хорошо обученный и квалифицированный персонал.
В чем разница между Элиза и вестерн-блот?
ELISA - это очень чувствительный и очень сложный метод, определяющий наличие антигена и антитела в крови пациента, тогда как вестерн-блоттинг - это метод, который определяет определенный белок из белковой смеси. В этом ключевое отличие Элизы от вестерн-блоттинга. Элиза является качественной, а также количественной. Напротив, вестерн-блоттинг является качественным. Иногда он полуколичественный. С точки зрения времени, затрачиваемого на тест, тест Элизы занимает много времени, в то время как вестерн-блоттинг требует больше времени, чем Элиза.
Приведенная ниже инфографика резюмирует разницу между Elisa и вестерн-блоттингом.
Резюме – Элиза против вестерн-блоттинга
ELISA - это очень чувствительный и очень сложный метод, который определяет наличие антигена и антитела в нашей крови. С другой стороны, метод вестерн-блоттинга разработан для идентификации определенного белка из белковой смеси. В этом ключевое различие между Элиза и вестерн-блоттингом. ИФА был первым тестом, предназначенным для обнаружения ВИЧ. Для подтверждения результатов теста ELISA можно использовать вестерн-блоттинг. И ИФА, и вестерн-блоттинг считаются непрямыми методами обнаружения ВИЧ.
