Ключевое различие между pBR322 и pUC19 заключается в том, что pBR322 представляет собой плазмидный вектор длиной 4361 пару оснований, а pUC19 - плазмидный вектор длиной 2686 пар оснований.
Клонирующий вектор представляет собой небольшой фрагмент ДНК, который может стабильно поддерживаться в организме. Это также небольшой фрагмент ДНК, в который можно вставить фрагмент чужеродной ДНК для целей клонирования. Вектор содержит важные особенности, позволяющие удобно вставлять фрагмент чужеродной ДНК в вектор, такие как сайты рестрикции, селектируемый маркер, репортерный ген и элемент экспрессии. Клонирование впервые было выполнено с использованием E.коли. Клонирующие векторы для E. coli включают плазмиды, бактериофаги, космиды и бактериальные искусственные хромосомы (ВАС). Наиболее часто используемые векторы представляют собой генетически сконструированные плазмиды. pBR322 и pUC19 представляют собой два типа плазмидных векторов.
Что такое pBR322?
pBR322 представляет собой плазмидный вектор. Это один из первых широко используемых векторов для клонирования E. coli. Этот вектор был впервые создан в 1977 году в лаборатории Герберта Бойера в Калифорнийском университете в Сан-Франциско. Это кольцевая двухцепочечная ДНК длиной 4361 пар оснований.
Рисунок 01: pBR322
Этот плазмидный вектор имеет особые свойства. Обычно он имеет два гена устойчивости к антибиотикам: ген bla, кодирующий белок устойчивости к ампициллину (AmpR), и ген tetA, кодирующий устойчивость к тетрациклину (TetR).) белок. Более того, он содержит ориджин репликации pMB1. Этот плазмидный вектор также имеет ген rop, кодирующий рестриктор числа копий плазмиды. Кроме того, этот вектор имеет уникальные сайты рестрикции для более чем 40 рестрикционных ферментов. Одиннадцать из этих сорока сайтов рестрикции лежат в пределах гена TetR. В промоторе гена TetRR есть два сайта рестрикции HindIII и ClaI. Кроме того, в гене AmpR есть шесть очень важных сайтов рестрикции. pBR322 представляет собой клонирующий вектор с низким числом копий. Это приблизительно обеспечивает 20 копий плазмиды на бактериальную клетку. Молекулярная масса вектора составляет 2,83×106 дальтон.
Что такое pUC19?
pUC19 представляет собой плазмидный вектор длиной 2686 пар оснований. Это один из серии плазмидных векторов, созданных Иоахимом Мессингом и его сотрудниками. Ранние работы над этой серией плазмид проводились в Калифорнийском университете. Это кольцевая двухцепочечная ДНК.
Рисунок 02: pUC19
Этот плазмидный вектор также обладает важными свойствами. Он имеет N-концевой фрагмент гена β-лактозидазы (lacz). Он также имеет область сайта множественного клонирования (MCS). Эта область расщеплена на кодоны 6 и 7 гена lacz. Область MCS обеспечивает множество сайтов рестрикции эндонуклеаз рестрикции. В дополнение к гену β-лактозидазы pUC19 также кодирует ген устойчивости к ампициллину (AmpR). Более того, точка начала репликации происходит от плазмиды pMB1. Хотя pUC19 небольшой по размеру, он имеет большое количество копий (500-700 копий на бактериальную клетку). Молекулярная масса этого плазмидного вектора составляет 1,75×106 дальтон.
Каковы сходства между pBR322 и pUC19?
- pBR322 и pUC19 представляют собой два типа плазмидных векторов.
- Они являются популярными векторами для клонирования кишечной палочки.
- Оба плазмидных вектора имеют одинаковую форму начала репликации плазмиды pMB1.
- Эти векторы имеют несколько сайтов рестрикции.
- Оба плазмидных вектора содержат ген устойчивости к ампициллину в качестве селектируемого маркера.
В чем разница между pBR322 и pUC19?
pBR322 представляет собой плазмидный вектор длиной 4361 пар оснований, тогда как pUC19 представляет собой плазмидный вектор длиной 2686 пар оснований. Таким образом, в этом ключевое отличие pBR322 от pUC19. Кроме того, pBR322 представляет собой плазмидный вектор с низким числом копий, тогда как pUC19 представляет собой плазмидный вектор с высоким числом копий.
Приведенная ниже инфографика представляет различия между pBR322 и pUC19 в табличной форме для параллельного сравнения.
Резюме – pBR322 против pUC19
Наиболее часто используемые векторы клонирования E.coli представляют собой генетически модифицированные плазмиды.pBR322 и pUC19 представляют собой два типа плазмидных векторов. pBR322 представляет собой плазмидный вектор длиной 4361 пару оснований, тогда как pUC19 представляет собой плазмидный вектор длиной 2686 пар оснований. Итак, в этом ключевое отличие pBR322 от pUC19.
