Ключевое различие между РИА и ИФА заключается в том, что радиоиммуноанализ (РИА) - это метод иммунологического анализа, в котором используются радиоизотопы для обнаружения комплексов антиген-антитело, а твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА) - это метод иммунологического анализа, в котором для обнаружения антигена используются ферменты. -комплексы антител.
Обнаружение специфических белков, таких как антигены, чрезвычайно важно для диагностики заболеваний. Таким образом, РИА и ИФА представляют собой два метода иммуноанализа, используемые в лабораториях для быстрого обнаружения специфических белков, особенно антигенов. Как правило, специфическое антитело связывается с антигеном-мишенью и образует видимый комплекс, известный как преципитин. Эти комплексы антител и антигенов можно идентифицировать с помощью различных методов. Метод обнаружения комплекса антиген-антитело с помощью радиоизотопов известен как РИА, а метод обнаружения комплекса антиген-антитело с использованием ферментов известен как ИФА..
Что такое RIA?
Радиоиммуноанализ (РИА) - это метод иммунологического анализа, который обнаруживает комплексы антигена и антитела с использованием радиоизотопов. Розалин Сассман Ялоу разработала эту технику в 1960 году с помощью Соломона Берсона. За это замечательное открытие Розалин Сассман Ялоу получила Нобелевскую премию по медицине в 1977 году. Как правило, в радиоиммуноанализе известное количество антигена сначала становится радиоактивным. В этом методе часто используются гамма-радиоактивные изотопы йода, называемые антигены. Эти радиоизотопы обычно присоединяются к аминокислоте тирозина антигена. Затем меченный радиоактивным изотопом антиген смешивают с антителом. В результате меченные радиоактивным изотопом антиген и антитело специфически связываются друг с другом.
Позже добавляется образец сыворотки, содержащий неизвестное количество того же антигена. Это заставляет немеченый антиген из сыворотки конкурировать с антигеном, меченным радиоактивным изотопом, за сайты связывания антител. По мере увеличения концентрации немеченого антигена большая его часть связывается с антителом, вытесняя вариант с радиоактивной меткой. Таким образом, он снижает отношение связанного с антителом антигена, меченного радиоактивным изотопом, к свободному антигену, меченному радиоактивным изотопом. В конце процедуры отделяют связанные антигены. Наконец, радиоактивность свободных антигенов в оставшемся супернатанте измеряют с помощью гамма-счетчика.
Что такое ИФА?
ELISA - это метод иммуноанализа, который обнаруживает комплексы антигена и антитела с помощью ферментов. Это биохимический аналитический анализ, впервые описанный Энгваллом и Перлманном в 1971 году. В большинстве простых форм методов ELISA антигены образца пациента прикрепляются к твердой поверхности. Затем на поверхность наносится соответствующее антитело, чтобы оно могло связываться с антигеном.
Рисунок 01: ИФА
Это конкретное антитело связано с ферментом. Позже любые несвязавшиеся антитела удаляются промыванием детергентом. На заключительном этапе этого метода добавляется субстрат фермента. Если происходит надлежащее связывание антигена и антитела, последующая реакция дает обнаруживаемый цветовой сигнал, чаще всего изменение цвета.
В чем сходство между РИА и ИФА?
- РИА и ИФА являются методами иммуноанализа.
- Оба метода обладают способностью образовывать комплексы антигена и антитела.
- Эти методы можно использовать для обнаружения неизвестных белков в образцах.
- Они оба используются для диагностики заболеваний в лабораториях.
- Оба метода очень специфичны и чувствительны.
В чем разница между РИА и ИФА?
RIA – это метод иммуноанализа для обнаружения комплекса антиген-антитело с использованием радиоизотопов. ELISA представляет собой метод иммуноанализа для обнаружения комплекса антиген-антитело с использованием ферментов. Итак, в этом ключевое отличие РИА от ИФА. Причем в методике РИА метят антиген, а в ИФА метят антитело. Кроме того, в методе РИА мечеными молекулами являются радиоизотопы, тогда как в ИФА мечеными молекулами являются ферменты. Таким образом, это еще одно отличие РИА от ИФА.
Приведенная ниже инфографика показывает больше различий между RIA и ELISA в табличной форме.
Резюме – РИА и ИФА
Иммуноанализы играют очень важную роль в различных биоаналитических установках, таких как клиническая диагностика, биофармацевтический анализ, мониторинг окружающей среды, биобезопасность и тестирование пищевых продуктов. С 1960-х годов был разработан широкий спектр иммуноанализов. РИА и ИФА являются методами иммуноанализа. РИА представляет собой метод иммуноанализа для обнаружения комплекса антиген-антитело с использованием радиоизотопов. ИФА представляет собой метод иммуноанализа для обнаружения комплекса антиген-антитело с использованием ферментов. Таким образом, это краткое изложение различий между РИА и ИФА.
