Ключевая разница - КОЕ против MPN
Колониеобразующая единица (КОЕ) и наиболее вероятное число (MPN) - два метода, используемые для подсчета микроорганизмов в образцах. Оба параметра используются для определения качества воды и фекальных индикаторных бактерий в пробах воды. Колониеобразующая единица - это мера, используемая для подсчета количества жизнеспособных бактериальных или грибковых клеток в определенном объеме или весе данного образца. Стандартная единица измерения этого параметра - КОЕ/мл или КОЕ/г. Наиболее вероятное число - еще одна единица, используемая для измерения числа жизнеспособных бактериальных клеток в образце жидкости. Ключевое различие между КОЕ и НЧЧ заключается в том, что КОЕ рассчитывают по бактериальным и грибковым колониям, растущим на твердой чашке с агаром, тогда как НЧЧ рассчитывают по жизнеспособным бактериям, растущим в жидкой среде.
Что такое КОЕ?
Колониеобразующая единица (КОЕ) - это параметр, который измеряет количество жизнеспособных бактериальных или грибковых клеток в данном образце. Метод подсчета колониеобразующих единиц называется стандартным чашечным подсчетом. Жизнеспособные колонии, появляющиеся на чашках с агаром, выражают в КОЕ на 1 мл (колониеобразующая единица на миллилитр) образца для жидкостей или в КОЕ на 1 г (колониеобразующая единица на один грамм) образца для твердых веществ.
Для измерения КОЕ в образце используются два распространенных метода. Это метод разбрасывания плиты и метод заливки плиты. Эти два метода поддерживаются методом, называемым серийным разведением. Серийно разведенные образцы позволяют получить счетное количество колоний на поверхности агара. Известный объем образца можно нанести на поверхность чашки с агаром или смешать с агаром и вылить на чашку. Затем планшет инкубируют и подсчитывают возникающие колонии. Количество колоний зависит от количества микроорганизмов в исходном образце. Чашки, которые показывают слишком много колоний или слишком мало колоний, исключаются из подсчета, поскольку результаты на этих чашках могут быть неточными. Статистически лучший диапазон составляет 30-300 колоний на чашке с агаром. Следовательно, для точного подсчета следует выбирать правильные пластины. Последовательное разбавление выполняется для вышеуказанной функции.
После подсчета числа жизнеспособных колоний на чашках можно рассчитать КОЕ/мл по следующей формуле.
КОЕ на мл исходного образца=количество колоний на чашке X коэффициент разбавления
Коэффициент разбавления=(1/Разбавление тарелки)
Например, если получить 149 колоний на чашке с разведением 10-4, то количество бактерий в 1 мл исходного образца можно рассчитать следующим образом:
КОЕ/мл=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 или 1490000
=1. 49 x 106
Рисунок 01: Колониеобразующая единица
Что такое MPN?
Наиболее вероятное число является альтернативным показателем КОЕ/мл. MPN также оценивает жизнеспособные клетки в образце жидкости. Он подсчитывает организмы, растущие в жидкой культуре, и является преимущественно бактериологическим методом. Этот метод особенно полезен для образцов, содержащих низкие концентрации бактериальных клеток; например, молоко, питьевая вода и т. д. Величина НДП выражена на 100 мл объема. MPN опирается на статистический метод, основанный на теории вероятностей. Существуют статистические таблицы, предназначенные для нахождения значений MPN на 100 мл пробы. В этих таблицах показаны результаты с доверительным интервалом 95 %.
Значение MPN рассчитывается после выполнения метода, называемого методом ферментации в нескольких трубках. Три набора пробирок, содержащих подходящую культуральную среду, инокулируют тремя различными объемами образца, такими как 10 мл, 1 мл и 0.1 мл и инкубируют для роста. После инкубационного периода пробирки оценивают + (положительно) или – (отрицательно) на наличие или отсутствие роста. Затем образец положительных и отрицательных результатов сравнивают с таблицей статистических вероятностей MPN для оценки количества микроорганизмов. Затем дается значение MPN для 100 мл пробы. MPN широко используется для обнаружения колиформных бактерий, присутствующих в пробах воды.
Рисунок 02: Таблица MPN
В чем разница между КОЕ и МПН?
CFU против MPN |
|
| КОЕ - это мера, используемая для выражения числа жизнеспособных бактериальных или грибковых колоний в данном образце. | MPN является альтернативой КОЕ и измеряет количество жизнеспособных бактериальных клеток в образце жидкости. |
| Единица | |
| КОЕ/мл или КОЕ/г | MPN/100 мл |
| Расчет | |
| КОЕ рассчитывают путем подсчета количества колоний, выращенных на чашках с агаром. | MPN рассчитывается путем сравнения положительного и отрицательного паттернов пробирок со статистической таблицей MPN. |
| Техника серийного разбавления | |
| Серийное разведение проводится перед помещением образцов на чашки с агаром. | Последовательное разведение обычно не выполняется при расчете MPN |
| Методы | |
| Метод разбрасывания и метод разливки - это два типа методов, применяемых для получения КОЕ. | Брожение в нескольких пробирках - это метод, применяемый для получения значения MPN. |
Резюме – КОЕ против MPN
Измерение микробного роста необходимо по многим причинам. На предприятиях пищевой промышленности необходимо измерять уровень и тип микроорганизмов в пищевых продуктах. В пищевой промышленности и медицине необходимо обеспечить эффективное применение методов стерилизации. На очистных сооружениях необходимо регулярно проводить подсчет микробов. При оптимизации процедуры в молекулярной биологии требуется измерять количество колоний на чашках. Следовательно, существуют различные методы подсчета и измерения роста. КОЕ и MPN - два таких метода, широко применяемых в различных областях. КОЕ - это мера количества жизнеспособных бактериальных и грибковых колоний, присутствующих в данном образце. Он рассчитывается с использованием стандартного метода подсчета чашек или метода подсчета жизнеспособных чашек. MPN - это еще одна мера, которая выражает количество бактериальных клеток, присутствующих в данном объеме жидкого образца. Он рассчитывается с использованием метода ферментации в нескольких пробирках и таблицы MPN. В этом разница между КОЕ и МПН.
Загрузить PDF-версию CFU vs MPN
Вы можете загрузить PDF-версию этой статьи и использовать ее в автономном режиме в соответствии с примечаниями к цитированию. Пожалуйста, загрузите PDF-версию здесь. Разница между CFU и MPN.
