Ключевая разница - RPMI против DMEM
Большинство научных исследований включают культивирование клеток животных, поэтому эти исследования требуют поддержания клеточных линий животных в особых условиях выращивания. Культивирование клеток животных широко используется в фармакологических исследованиях для определения метаболизма лекарств, в диагностике заболеваний и в исследованиях рака. Среда для культивирования клеток является важным аспектом культуры клеток животных. Модифицированная среда Игла Дульбекко (DMEM) и среда Мемориального института Розуэлл-Парка (RPMI) представляют собой две культуральные среды, используемые для культивирования клеток животных. RPMI представляет собой среду, широко используемую для культивирования клеток млекопитающих в суспензионной культуре. DMEM представляет собой модифицированный тип базовой среды с повышенными концентрациями аминокислот и витаминов до четырех раз. DMEM используется для культивирования клеток в адгезивных культурах. Ключевое различие между двумя СМИ заключается в типе культуры СМИ. RPMI используется для суспензионных культур, тогда как DMEM используется для культивирования прикрепленных клеток.
Что такое RPMI?
RPMI или среда Мемориального института Розуэлл-Парка также упоминается как RPMI 1640. Название среды было получено от института, в котором среда была обнаружена. Эта среда обычно используется в культуре клеток животных, особенно для роста клеток млекопитающих. Первоначально они были разработаны для выращивания лимфоцитов человека.
В состав RPMI входят следующие ингредиенты.
- Глюкоза
- Индикатор pH (феноловый красный)\
- Соли (хлорид натрия, бикарбонат натрия, динатрийфосфат, хлорид калия, сульфат магния и нитрат кальция)
- Аминокислоты
- Витамины (и-инозитол, хлорид холина, парааминобензойная кислота, фолиевая кислота, никотинамид, гидрохлорид пиридоксина, гидрохлорид тиамина, пантотенат кальция, биотин и рибофлавин, цианокобаламин)
Особенностью RPMI является повышенная концентрация фосфатов в среде. RPMI используется в атмосфере с 5% углекислым газом. Это обеспечит максимальные и оптимальные условия для роста клеток. pH среды поддерживается на уровне 8,0 с помощью бикарбонатной буферной системы.
Рисунок 01: Культура клеток в чашке Петри
Применение RPMI в культивировании клеток
- Культивирование Т- и В-лимфоцитов человека, клеток костного мозга и гибридомы.
- Используется для изучения опухолевых клеток человека.
Что такое DMEM?
Модифицированная среда Игла Дульбекко (DMEM) представляет собой модифицированную среду, которая производится в промышленных масштабах. Исходная текстура среднего порошка желтого цвета. В DMEM концентрация витаминов увеличивается в четыре раза, что увеличивает содержание питательных веществ в среде.
DMEM также модифицируют, добавляя больше солей, таких как нитрат железа, пируват натрия и некоторые незаменимые аминокислоты, такие как серин и глицин. Изменяется и состав глюкозы в средах. Исходный состав состоит из 1000 мг/л глюкозы, тогда как в DMEM концентрация увеличена до 4500 мг/л. DMEM также требует добавления сывороточной среды, поскольку она не является полной средой. Чаще всего DMEM дополняют эмбриональной бычьей сывороткой (FBS). FBS обеспечивает необходимые белки и факторы роста для процесса культивирования.
pH среды изменяется при добавлении бикарбоната натрия. рН среды до добавления бикарбоната натрия составляет около 6,80-7,40, тогда как рН после добавления бикарбоната натрия находится в диапазоне 7,60-8,20. Температура хранения среды 2 – 8°С0C.
Рисунок 02: DMEM
Применения DMEM
- Для изучения способности полиомавируса образовывать бляшки в эмбриональных клетках мышей.
- В исследованиях контактного торможения.
- В исследованиях и анализе культур куриных клеток.
В чем сходство между RPMI и DMEM?
- И RPMI, и DMEM используются в культуре клеток животных.
- Среды RPMI и DMEM представляют собой жидкие составы.
- Среды RPMI и DMEM содержат незаменимые аминокислоты, витамины и неорганические соли, необходимые для роста.
- Носители RPMI и DMEM неполны. Поэтому следует добавить сыворотку.
- И среды RPMI, и среды DMEM используют глюкозу в качестве источника углерода.
- И среды RPMI, и среды DMEM имеют более высокий уровень pH.
В чем разница между RPMI и DMEM?
RPMI против DMEM |
|
| RPMI - это среда, широко используемая для культивирования клеток млекопитающих в суспензионной культуре. | DMEM представляет собой модифицированный тип базовой среды с повышенной концентрацией аминокислот и витаминов. |
| Наличие дополнительных фосфатов | |
| Присутствует в RPMI. | Отсутствует в DMEM. |
| Используйте | |
|
Используется для культивирования клеток в адгезивных культурах. Он привык,
|
| Виды культуры | |
| RPMI используется для суспензионных культур. | DMEM используется для культур с прикрепленными клетками. |
Резюме – RPMI против DMEM
И RPMI, и DMEM широко используются в культивировании клеток животных, особенно для культивирования клеточных линий животных, включая лимфоциты, in vitro. DMEM представляет собой модифицированную базальную среду с повышенной концентрацией питательных веществ. RPMI, разработанная Мемориальным институтом Розуэлл-Парк, также является средой, используемой для культивирования клеток животных, особенно для лимфоцитов млекопитающих. Оба носителя коммерчески доступны. В этом разница между RPMI и DMEM.
