Ключевая разница - окрашивание по Граму против культуры
Окрашивание по Граму - это метод окрашивания, который применяется для дифференциации бактерий на две группы в зависимости от толщины слоя пептидогликана в их клеточной стенке. Культура – это метод выращивания и поддержания микроорганизмов в лабораторных условиях для различных анализов. Ключевое различие между окрашиванием по Граму и культурой заключается в их функции; штамм грамм метод окрашивания бактерий, при котором культура является методом выращивания и поддержания микроорганизмов.
Что такое окрашивание по Граму?
Окрашивание по Граму - важный метод дифференциального окрашивания, используемый для идентификации бактерий в микробиологии. Этот метод был представлен датским бактериологом Гансом Христианом Грамом в 1884 году. Окрашивание по Граму делит бактерии на две основные группы: грамположительные и грамотрицательные; они очень важны для классификации и идентификации бактерий. Окрашивание по Граму выполняется в качестве начального этапа характеристики бактерий.
Бактерии сгруппированы на основе различий в их клеточной стенке. Грамположительные бактерии содержат толстый слой пептидогликана в своей клеточной стенке, в то время как грамотрицательные бактерии содержат тонкий слой пептидогликана в своей клеточной стенке, как показано на рисунке 01. Результат окрашивания по Граму будет основываться на разнице в толщине слоя пептидогликана в клеточной стенке. клеточная стенка.
Рисунок 1: Грамположительные и грамотрицательные бактерии
Окрашивание по Граму выполняется с использованием четырех различных реагентов, а именно; первичное пятно, морилка, обесцвечивающий агент и встречное пятно. Кристаллический фиолетовый и сафранин служат в качестве основного красителя и встречного красителя, соответственно, а граммы йода и 95% спирта служат в качестве протравы и обесцвечивателя соответственно.
Основные этапы окрашивания по Граму
- Мазок бактерий готовят на чистом предметном стекле, фиксируют нагреванием и охлаждают.
- Мазок заливают кристаллическим фиолетовым на 1-2 минуты.
- Мазок промывается медленно проточной водой из-под крана, чтобы удалить излишки пятен.
- Грамм йода наносят на мазок на 1 минуту.
- Мазок промывается медленно проточной водопроводной водой
- Мазок промывают 95% спиртом в течение 2 – 5 секунд и ополаскивают медленно проточной водопроводной водой.
- Мазок докрашивают сафранином в течение 1 минуты
- Мазок промывают медленно проточной водопроводной водой, высушивают и исследуют под микроскопом.
В конце окрашивания по Граму грамотрицательные бактерии будут наблюдаться в розовом цвете, а грамположительные бактерии будут наблюдаться в фиолетовом цвете, как показано на рисунке 02. Результат окрашивания по Граму определяется толщиной пептидогликанового слоя в их клеточной стенке. На этапе обесцвечивания первичный краситель и протрава легко удаляются с грамотрицательных бактерий и обесцвечиваются, поскольку они имеют тонкий слой пептидогликана. Первичное окрашивание сохраняется у грамположительных бактерий, поскольку они имеют толстый слой пептидогликана. Контрокрашивание не будет эффективным для грамположительных бактерий из-за сохранения основного окрашивания. Таким образом, грамположительные бактерии будут видны в основном цвете пятна, то есть в пурпурном цвете. Встречная окраска окрашивает грамотрицательные бактерии и будет видна в пиковом цвете, который является цветом сафранина. Следовательно, с помощью окрашивания по Граму легко разделить бактерии на две группы, и это полезно для дифференциации и идентификации бактерий.
Рисунок 2: Штамм по граммам
Что такое культура?
Микрокультура – метод культивирования и поддержания микроорганизмов в лабораторных условиях для различных целей. Культуры выращивают на твердых, полутвердых и жидких средах в зависимости от вида и цели культивирования микроорганизмов. Культуры обеспечиваются необходимыми питательными веществами и условиями роста, необходимыми микроорганизмам. Существуют различные компоненты питательной среды, такие как источник энергии, источник углерода, источник азота, минералы, питательные микроэлементы, вода, отвердитель и т. д. Оптимальная температура, кислород и рН должны быть отрегулированы в соответствии с типом выращиваемого микроорганизма.
Существуют различные типы микробных культур; например, периодическая культура, непрерывная культура, палочкоядерная культура, культура на чашках с агаром, культура в бульоне и т. д. В зависимости от состава питательной среды существуют различные типы питательных сред, известные как синтетические среды, полусинтетические среды и натуральные среды. Микробные культуры готовятся в стерильных условиях внутри специальной камеры, называемой ламинарным потоком воздуха. Среду для выращивания и стеклянную посуду стерилизуют перед инокуляцией желаемого микроорганизма. В надлежащих стерильных условиях целевой микроорганизм переносят в стерилизованную питательную среду и инкубируют при оптимальной температуре. Внутри среды микроорганизмы будут расти и размножаться, используя предоставленные питательные вещества.
Рисунок 3: Бактериальная культура на чашке
В чем разница между окрашиванием по Граму и культурой?
Окрашивание по Граму против культуры |
|
| Штамм Grams - это метод дифференциального окрашивания, используемый для дифференциации и идентификации бактерий. | Микрокультура – это метод выращивания микроорганизмов в лаборатории. |
| Компоненты | |
| Для этого используются разные реагенты, включая два красителя. | При этом используются различные питательные среды, такие как твердые, полутвердые и жидкие среды, состоящие из питательных веществ и других необходимых условий. |
| Основные функции | |
| Это позволяет разделить бактерии на две группы: грамотрицательные и грамположительные. | Это позволяет размножать микроорганизмы для различных целей. |
| База | |
| Результат окрашивания по Граму основан на различиях в пептидогликановом слое клеточной стенки. | Микроорганизмы будут расти и размножаться внутри питательных сред. |
| Результат | |
| Грамотрицательные бактерии видны розовым цветом, а грамположительные бактерии видны фиолетовым цветом. | На чашках видны колонии микроорганизмов. На жидких средах микроорганизмы находятся во взвешенном состоянии. |
Резюме – Окрашивание по Граму против культуры
Микробные культуры готовят и поддерживают в лабораторных условиях для различных целей, таких как хранение, тестирование, химическая очистка и т. д. Окрашивание по Граму - это процедура окрашивания, которая дифференцирует бактерии на две основные группы, называемые грамотрицательными бактериями и грамположительными бактериями. Следовательно, разница между окрашиванием по Граму и культурой заключается в том, что окрашивание по Граму - это метод окрашивания бактерий, а культура - это метод выращивания и поддержания микроорганизмов в лабораториях.
