Основное различие между Elisa и Elispot заключается в том, что Elisa представляет собой иммуноферментный анализ, который определяет общую концентрацию секретируемых сигнальных белков, а Elispot представляет собой иммуноферментный анализ, который обнаруживает отдельные клетки, секретирующие цитокины.
Elisa и Elispot - два иммуноферментных анализа, широко применяемых в медицине, фитопатологии, биотехнологии и различных фармацевтических отраслях. В этих методах анализируемый белок обнаруживается антителом, направленным против него. ИФА - наиболее популярный иммуноферментный анализ, используемый в лабораториях. С другой стороны, Elispot представляет собой твердофазный иммуноферментный анализ, который не используется вместо ELISA, а используется в лабораториях в дополнение к ELISA.
Что такое Элиза Ассей?
ИФА – иммуноферментный анализ, определяющий общую концентрацию секретируемых сигнальных белков. Это широко используемый аналитический биохимический анализ, впервые описанный Энгваллом и Перлманном в 1971 году. В этом методе используется твердофазный тип иммуноферментного анализа для обнаружения присутствия определенного белка в жидком образце с использованием антител, направленных против этого конкретного белка. Этот анализ является широко используемым диагностическим инструментом в медицине, патологии растений и биотехнологии.
Механизм ИФА теста
В большинстве тестов ELISA неизвестное количество антигена иммобилизуется на твердой подложке (микропланшете) в начале. Затем на поверхность твердой подложки наносят соответствующее первичное антитело. Это антитело образует комплекс с антигеном (комплекс антиген-антитело). Связанное с антигеном первичное антитело может быть обнаружено вторичным антителом, которое связано с ферментом посредством биоконъюгации. На заключительном этапе теста ИФА добавляется вещество, содержащее субстрат фермента. Если происходит надлежащее связывание первичного антитела с антигеном, субстрат вызывает заметное изменение цвета. В конечном счете, это дает количественную оценку антигена в образце.
Рисунок 01: Различные типы Элизы
Кроме того, существуют различные подходы к Элизе, такие как прямая Элиза и непрямая Элиза. В настоящее время различные тесты ИФА используются для обнаружения патогенов человека, таких как Mycobacterium tuberculosis, ротавирус, вирус гепатита B, вирус гепатита C, энтеротоксины, продуцирующие E.coli, ВИЧ и SARS-CoV-2.
Что такое анализ Элиспота?
Elispot представляет собой иммуноферментный анализ, который выявляет отдельные клетки, секретирующие цитокины. Сесил Черкински впервые описал ELISpot в 1983 году. Это тип анализа, который фокусируется на количественном измерении частоты секреции цитокинов отдельной клеткой. Он также классифицируется как метод, в котором используются антитела для обнаружения анализируемого биологического или химического белка. Анализ Fluorospot представляет собой разновидность анализа Elispot, в котором используется флуоресценция для анализа нескольких аналитов (более секретных белков).
Механизм теста Элиспота
В этом механизме моноклональные антитела, специфичные к цитокинам, сначала добавляют в лунки микропланшета. Затем в лунки добавляют желаемые наблюдаемые клетки. Позже клетки инкубируют. Во время инкубации клетки позволяют клеткам реагировать на любые раздражители и секретировать цитокин. Цитокины, секретируемые инкубируемыми клетками, будут присоединяться к антителам, поскольку клетки окружены цитокин-специфичными моноклональными антителами.
Рисунок 02: Анализ Элиспота
Для обнаружения этих моноклональных антител, специфичных к цитокинам, в лунку добавляют биотинилированные специфичные антитела для обнаружения. Биотинилированные специфические детектирующие антитела захватывают цитокин-специфические моноклональные антитела в лунках. Кроме того, в лунки добавляют конъюгаты стрептавидин-фермент для связывания с детектирующими антителами. На последнем этапе в лунки добавляют определенные субстраты. Реакции конъюгатов ферментов и субстратов дают отчетливые пятна в лунках. Эти отчетливые пятна считываются автоматическим считывателем ELISpot. В конечном итоге это позволит дополнительно рассчитать частоту секреции цитокинов.
В чем сходство Элизы и Элиспота?
- Они оба являются иммуноферментными анализами.
- Оба метода определяют специфические белковые аналиты.
- В этих анализах используются специфические антитела для идентификации белковых аналитов.
- В обоих тестах используются ферменты и субстраты.
- Они используются в качестве диагностического инструмента в медицинских лабораториях.
В чем разница между Элисой и Элиспот?
ИФА – иммуноферментный анализ, определяющий общую концентрацию секретируемых сигнальных белков. С другой стороны, Elispot представляет собой иммуноферментный анализ, который измеряет отдельные клетки, секретирующие цитокины. Итак, в этом ключевое отличие Элизы от Элиспота. Более того, в тесте ELISA антиген сначала иммобилизуют на микролунках. Напротив, в тесте Элиспота антитело сначала иммобилизуют в лунках микролитров. Таким образом, это еще одно различие между Элисой и Элиспот.
Приведенная ниже инфографика представляет подробный анализ различий между Elisa и Elispot в табличной форме.
Резюме – Элиза против Элиспота
Elisa и Elispot - два иммуноферментных анализа, широко применяемых в медицине, фитопатологии, биотехнологии и различных фармацевтических отраслях. Элиза определяет присутствие лиганда (белка) в образце жидкости с помощью антител, направленных против измеряемого лиганда. Анализ Элиспота является широко используемым методом мониторинга иммунных реакций. Он обнаруживает отдельные клетки, секретирующие цитокины, с помощью антител. Это и иммуноанализ, и метод биоанализа. Таким образом, это краткое изложение различий между Элисой и Элиспот.
