Ключевое различие между HEK293 и HEK293t заключается в том, что HEK293 представляет собой иммортализованную клеточную линию, полученную из эмбриональной почки человека, которая трансфицирована расщепленной ДНК аденовируса человека типа 5, в то время как HEK293t является дочерней клеточной линией, полученной из исходной клеточной линии HEK293, которая трансфицировали плазмидным вектором, несущим точку начала репликации SV40.
Трансфекцию обычно определяют как процесс введения чужеродной ДНК и РНК в клетки с целью воздействия на их генотип и фенотип. Такое введение чужеродных нуклеиновых кислот различными биологическими, химическими и физическими методами может изменить свойства клетки. В конечном счете, это позволяет изучать функцию генов и экспрессию белков в контексте клетки. HEK293 и HEK293t - это две клеточные линии, которые в течение многих лет широко использовались в исследованиях клеточной биологии из-за их склонности к трансфекции.
Что такое HEK293?
HEK293 представляет собой иммортализованную клеточную линию, полученную из эмбриональной почки человека, которая трансфицирована расщепленной ДНК аденовируса человека типа 5 для получения множества рекомбинантных белков. Первоначально HEK293 были выделены из клеток почек человека голландским биологом Алексом Ван дер Эбом в 1973 году. Эти клетки были выращены в культуре тканей плода женского пола. Позже они были трансфицированы срезанной ДНК аденовируса человека типа 5 Фрэнком Грэмом, постдокторантом в лаборатории Ван дер Эба. Эта клеточная линия была названа HEK293, потому что это был эксперимент Фрэнка 293rd..
Рисунок 01: HEK293
Включение аденовирусных генов в геном клеток HEK позволяет этим клеткам очень эффективно производить большое количество рекомбинантных белков. Более того, аденовирусный вектор содержит промоторную область CMV; следовательно, это еще больше увеличивает эту эффективность. Эта клеточная линия использовалась в качестве хозяина для исследований экспрессии генов. Эта клеточная линия также используется биотехнологической промышленностью для производства терапевтических белков для генной терапии.
Что такое HEK293t?
HEK293t представляет собой дочернюю клеточную линию, полученную из исходной клеточной линии HEK293, которую трансфицировали плазмидным вектором, несущим точку начала репликации SV40, с получением большого количества рекомбинантных белков. HEK293t представляет собой клеточную линию человека, которая экспрессирует мутантную версию большого Т-антигена SV40. HEK293t был создан в лаборатории Микеле Карлоса в Стэнфорде путем стабильной трансфекции клеточной линии HEK29E плазмидой, кодирующей чувствительный к температуре мутант большого Т-антигена SV40. Первоначально он назывался 293/tsA1609neo. Это связано с тем, что трансфекция используется для создания клеточной линии, которая придает устойчивость к неомицину и экспрессию аллеля tsA 1609 большого Т-антигена SV40.
Рисунок 02: HEK293t
Благодаря экспрессии мутантной версии большого Т-антигена SV40 трансфицированные плазмиды с началом репликации SV 40 могут значительно увеличить количество рекомбинантного белка. Эта клеточная линия обычно используется в биотехнологической промышленности для экспрессии белков и производства рекомбинантных ретровирусов.
В чем сходство между HEK293 и HEK293t?
- HEK293 и HEK293t - две клеточные линии, которые широко использовались в исследованиях клеточной биологии из-за их склонности к трансфекции.
- Обе клеточные линии получены в лаборатории.
- Эти клеточные линии могут значительно увеличить количество продукции рекомбинантного белка.
- Они получают путем трансфекции эмбриональных клеток почек человека плазмидным вектором.
В чем разница между HEK293 и HEK293t?
HEK293 представляет собой иммортализованную клеточную линию, полученную из эмбриональной почки человека, которая трансфицирована расщепленной ДНК аденовируса человека типа 5. Напротив, HEK293t представляет собой дочернюю клеточную линию, полученную из исходной клеточной линии HEK293, которая трансфицирована плазмидным вектором, несущим точку начала репликации SV40. Итак, в этом ключевое отличие HEK293 от HEK293t. Кроме того, HEK293 не экспрессирует мутантную версию большого Т-антигена SV40. С другой стороны, HEK293t экспрессирует мутантную версию большого Т-антигена SV40.
В следующей инфографике перечислены различия между HEK293 и HEK293t в табличной форме для параллельного сравнения.
Резюме – HEK293 против HEK293t
HEK293 и HEK293t - две клеточные линии, которые широко использовались в исследованиях клеточной биологии из-за их устойчивого роста и склонности к трансфекции. HEK293 представляет собой иммортализованную клеточную линию, полученную из эмбриональной почки человека, которая трансфицирована расщепленной ДНК аденовируса человека типа 5, тогда как HEK293t представляет собой дочернюю клеточную линию, полученную из исходной клеточной линии HEK293, которая трансфицирована плазмидным вектором, несущим точку начала репликации SV40. Таким образом, это суммирует разницу между HEK293 и HEK293t.
