Основное различие между изократической и градиентной элюцией заключается в том, что изократическая элюция относится к поддержанию постоянной концентрации в подвижной фазе, тогда как градиентная элюция относится к поддержанию переменной концентрации в подвижной фазе.
Термины изократическое и градиентное элюирование используются в хроматографии. Во время хроматографического цикла мы используем стационарную фазу, которая является неподвижным веществом, наряду с подвижной фазой, движущимся веществом. Изократическое и градиентное элюирование описывает свойства подвижной фазы.
Что такое изократическое элюирование?
Изократическое элюирование - это термин, используемый в хроматографии, когда подвижная фаза имеет постоянную концентрацию. При этом концентрация подвижной фазы постоянна на протяжении всего хроматографического процесса. В этом процессе мы можем наблюдать линейное увеличение ширины пика со временем удерживания на хроматограмме. Однако это приводит к недостатку - пики позднего элюирования для позднего элюирования становятся очень плоскими и широкими. Поэтому эти широкие пики трудно распознать как пики.
Более того, при изократическом элюировании селективность не меняется в зависимости от размеров колонки. Это означает, что селективность не зависит от изменения размеров колонки. Здесь длина и диаметр считаются размерами колонны. Следовательно, пики элюируются в том же порядке.
Что такое градиентное элюирование?
Градиентное элюирование - это термин, используемый в хроматографии, когда подвижная фаза имеет различную концентрацию. Другими словами, концентрация подвижной фазы не должна оставаться постоянной. Например, в ВЭЖХ в обычном методе разделения сначала используется 10 % метанола, а в конце - 90 % с постепенным увеличением концентрации. Подвижная фаза состоит из двух компонентов: слабого растворителя и сильного растворителя. Слабый растворитель позволяет растворенному веществу элюироваться медленно, в то время как сильный растворитель вызывает быстрое элюирование растворенного вещества. В обращенно-фазовой хроматографии мы используем воду в качестве слабого растворителя и органический растворитель в качестве сильного растворителя.
Рисунок 01: ВЭЖХ
Кроме того, метод градиентного элюирования уменьшает количество более поздних элюирующих компонентов, чтобы заставить их элюироваться быстрее, что дает узкий пик на хроматограмме. Этот метод также улучшает форму и высоту пика. Кроме того, в методе градиентного элюирования порядок элюирования меняется с изменением размеров колонки.
В чем разница между изократическим и градиентным элюированием?
Термины изократическое и градиентное элюирование используются в хроматографии. Изократическое и градиентное элюирование описывают свойства подвижной фазы. Ключевое различие между изократическим и градиентным элюированием заключается в том, что изократическое элюирование относится к поддержанию постоянной концентрации в подвижной фазе, тогда как градиентное элюирование относится к поддержанию переменной концентрации в подвижной фазе.
В методе изократического элюирования ширина пика линейно увеличивается со временем удерживания. Однако в методе градиентного элюирования удержание компонентов, элюирующихся позже, уменьшается, так что элюирование становится более быстрым и дает узкие пики. Кроме того, при изократическом элюировании селективность не зависит от размеров колонки, а при градиентном элюировании селективность изменяется при изменении размеров колонки.
В следующей таблице приведены различия между изократическим и градиентным элюированием.
Резюме – Изократическая и градиентная элюция
Изократическое элюирование и градиентное элюирование описывают свойства подвижной фазы. Ключевое различие между изократическим и градиентным элюированием заключается в том, что изократическое элюирование относится к поддержанию постоянной концентрации в подвижной фазе, тогда как градиентное элюирование относится к поддержанию переменной концентрации в подвижной фазе.
